2016年第37卷第6期云南中醫(yī)中藥雜志通痹膏的提取工藝研究劉鳳樂,楊忠進,謝建苗,王蕊蕊,高文全(大理州中醫(yī)醫(yī)院,云南大理671000)摘要:目的優(yōu)選通痹膏的最佳提取工藝。方法采用L(3“)正交試驗法,考察加水倍量、煎煮時間和煎煮次數(shù)3個因素以提取物干浸膏得率為考察指標,優(yōu)選確定最佳提取工藝。結(jié)果最佳提取工藝為A3B2C3,即加水倍量12倍,煎煮時間90min,煎煮次數(shù)3次。結(jié)論通過驗證實驗,通痹膏提取工藝合理可行,所優(yōu)選的提取工藝條件提取浸膏得率較高,能夠較好的保證有效成分提取率。關(guān)鍵詞:通痹膏;正交實驗;提取工藝中圖分類號:R84文獻標志碼:A文章編號:1007-2349(2016)06-0073-03通痹膏是根據(jù)本院臨床驗方所研制的院內(nèi)中藥制劑,由的以肢體、關(guān)節(jié)疼痛、酸楚、麻木、重著以及活動障礙甚或關(guān)節(jié)忍冬藤、透骨草、木瓜、桂枝等藥物組成,用于中老年風(fēng)濕痹腫大灼熱等為主要癥狀的病癥,臨床上具有漸進性或反復(fù)發(fā)痛腰腿疼痛等病癥。痹證,正如《素問·痹論》所云:“風(fēng)作的特點。其病機主要是氣血閉阻不通,肌肉關(guān)節(jié)失于濡養(yǎng)寒濕三氣雜至,合而為痹也”。是因為感受風(fēng)寒濕熱之邪引起所致。西醫(yī)治療痹證所采用的方法是抗炎鎮(zhèn)痛與激素治療,耳中單一核細胞、中性粒細胞浸潤和充血水腫2組與模型組機制,并通過急性毒性試驗從科學(xué)角度驗證其毒副作用比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05),但涼血止癢合劑組和陽性對照通過以上的研究表明,涼血止癢合劑具有較為明確的抗組比較沒有統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05),說明涼血止癢合劑與醋酸炎作用,其抗炎作用可能與提高細胞因子L-10的產(chǎn)生水平地塞米松片均具有抗炎的作用,但涼血止癢合劑的抗炎作用有關(guān),且無毒副作用,安全有效。不僅為其它變態(tài)反應(yīng)參與的并不優(yōu)于醋酸地塞米松皮膚病的防治開拓新的思路,同時為名老中醫(yī)臨床經(jīng)驗的應(yīng)在細胞因子L-10的研究中,與模型對照組比較,陽性推廣提供了科學(xué)依據(jù),為進一步挖掘及研究名老中醫(yī)學(xué)術(shù)藥地塞米松和涼血止癢合劑藥物均顯著提高具有免疫抑制活思想和臨床經(jīng)驗提供了新的思路性細胞因子-10的產(chǎn)生水平,差異均有顯著性意義(P<0.05),但陽性對照組與涼血止癢合劑組比較,差異不顯著參考文獻(P>0.05);說明地塞米松和涼血止癢合劑均通過提高具有免[1]趙辨.中國臨床皮膚病學(xué)[M]4版.南京:江蘇科技出版社,疫抑制活性細胞因子L-10的產(chǎn)生水平來達到抗炎的作用2010:95-97,140,717-760但涼血止癢合劑并不優(yōu)于醋酸地塞米松。對于IFN-y的影[2]李敏.疏風(fēng)飲對變應(yīng)性接觸性皮炎小鼠脾指數(shù)、胸腺指數(shù)及IFN-y與-4分泌的影響[J].實用中醫(yī)內(nèi)科雜志,2011,25(1):響研究中,與模型對照組比較陽性藥地塞米松組IFN-y產(chǎn)24-25生顯著減少,差異有顯著性意義(P<0.01),然而涼血止癢合[3]任興斌,諸葛寶忠,季海生,濕疹患者外周血CD4·Cm2s劑對小鼠細胞因子IFN-y產(chǎn)生無明顯的影響(P>0.05),說FOXP3+調(diào)節(jié)性T細胞和血清L-4,L-10,TGF-B檢測及臨明地塞米松通過降低IFN-y的水平,進而發(fā)揮抗炎癥作用,床研究[門].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2010,25(3):131-133但涼血止癢合劑對IFN-y水平的影響不顯著。中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社通過急性毒性試驗,對照組和涼血止癢合劑組小鼠均存活肝臟解剖未見明顯異常,表明涼血止癢合劑無毒副作用,[5]雙雙,賴維,變應(yīng)性接觸性皮炎免疫學(xué)發(fā)病機制研究進安全有效。展[打].國際皮膚性病學(xué)雜志,2011,37(3):158-160涼血止癢合劑臨床應(yīng)用已十多年,并在云南中醫(yī)醫(yī)療集6朱平,杜小萍鞠吉雨.Ⅱ-10與疾病關(guān)系的研究進展[J國際免團20余家醫(yī)院廣泛使用,臨床療效顯著,具有明顯抗炎止癢疫學(xué)雜志,2012,35(1):14-17的作用,且無明顯毒副作用?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究證明其組方中[7]楊正生楊會君,王亞斐,等,丹皮酚對小鼠變應(yīng)性接觸性皮炎的黃芩、丹皮、赤芍、紫草、荊芥均有一定的抗炎作用,對I、Ⅱ、Thl/Th2分子表達的影響[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2012,43(12):I和Ⅳ變態(tài)反應(yīng)均有抑制作用,對白介素、IFN-y等細胞因[8]劉欣,李萍,趙京霞,等.涼血活血膠囊全方及拆方對 Jurkat T淋巴子的表達水平均有影響,為組方的合理性提供了一定現(xiàn)細胞增殖活化及釋放細胞因子的影響[J.中國實驗方劑學(xué)雜代藥理學(xué)依據(jù),但中藥復(fù)方通常作用于機體多靶點、多環(huán)節(jié)是個復(fù)雜系統(tǒng),故有必要進一步深入研究,闡明其抗炎的作用中國煤化工g期:216-03-28CNMHG作者簡介:劉鳳樂(1984-),男漢族,安徽蚌埠人,主管藥師研究方向:院內(nèi)制劑研發(fā)。E-mal:ncpu@163.com云南中醫(yī)中藥雜志2016年第37卷笫6期重點是解除患者的癥狀如疼痛、腫脹、功能缺失;而中醫(yī)則側(cè)2.4浸膏得率的測定按照L2(3)正交表安排實驗,分別精重于病因、病機治療,如祛風(fēng)、除濕、散寒、活血、通絡(luò)、扶正等,密吸取9組實驗一定體積的提取液置于已干燥至恒重的蒸尤其是西醫(yī)的激素治療與中醫(yī)的扶正治療幾乎是正相反的,發(fā)皿中加熱濃縮至稠浸膏(含水量約為40%-60%),轉(zhuǎn)移個是運用免疫抑制劑;一個是增強免疫功能。而且西藥治至水分測定儀測出含水量,計算出浸膏得率。疔痹證會帶來些許副作用,從而影響患者的身體,不宜長期使2.5工藝流程用。通痹膏外敷于局部經(jīng)透皮吸收后控制和緩解疼痛標本稱量藥材_→煎煮藥材_≯濃縮藥液→測稠膏水分兼治,對于長期用藥的患者來說比較合適。為更加方便患者的攜帶使用,改變原有應(yīng)用方式,對通痹膏的提取工藝進行研計算浸膏得率究,為該劑型進一步研究奠定基礎(chǔ)。26提取工藝優(yōu)選6依處方組成配比稱取藥材,先浸泡1儀器與試藥30mn,然后按L(3“)正交表安排試驗進行煎煮提取將煎煮所1.1儀器AR423DCN電子天平(奧豪斯儀器有限公司);得溶液濃縮得浸膏分別計算浸膏得率分析結(jié)果見表2,表3。表2正交實驗設(shè)計及結(jié)果D215CD電子天平(奧豪斯國際貿(mào)易有限公司);MB54鹵素水分測定儀(奧豪斯儀器有限公司);C21-S2118電磁爐(廣因素評價指標東美林生活電器有限公司); SUPERwscYLRO-3000M水處A(加水倍量)B(提取時間)C(提取次數(shù))D浸膏得率(%)理系統(tǒng)(誼利廣州有限公司);HH.S型電熱恒溫水浴鍋(上海醫(yī)療器械五廠)。1.2試藥藥材購于云南白藥集團股份有限公司中藥飲片1234l1.60712.616分公司(由中藥庫采購,經(jīng)趙愛梅副主任藥師鑒定均為合格232323313.7792方法與結(jié)果3210.60721提取方法的選擇結(jié)合臨床應(yīng)用經(jīng)驗和生產(chǎn)條件組方715.413藥材分為兩部分,一部分為貴重藥材或主要化學(xué)成分不宜煎煮藥材打成細粉入藥,另一部分主要含有機酸類、皂苷類等極15.506性較大成分藥材采用水煎煮。22L(3)正交試驗的設(shè)計2-5根據(jù)煎煮法的條件選擇K12.224965612.785加水倍量(A)提取時間(B)及提取次數(shù)(C)3個條件為考察k213.27512.59613.653112.565因素,各因素根據(jù)實際情況均取3個水平,以提取物干浸膏得Kl2.93314.46612.402率為評價指標篩選最佳提取工藝因素水平表見表1,L2(3“)3.3420.7094.8100.383正交實驗安排表見表2表3方差分析表表1因素水平表方差來源離差平方和自由度方差F比P值顯著性因素水平18.89929.45085.131<0.05加水倍量(A)煎煮時間(B,h)提取次數(shù)(C)B0.75320.3773.392>0.0539.632219.816178.523<0.01D0.2203注:Fa05(2,2)=19,Fa01(2,2)=9923稠浸膏水分含量測定方法釆用鹵素水分測定儀測稠結(jié)合極差分析表和方差分析表以提取物干浸膏得率為浸膏水分含量該儀器可用來測量任何物質(zhì)含水量?？疾熘笜烁髦笜艘蛩氐闹鞔雾樞驗?C>A>B,提取過程中23.1鹵素水分測定儀的操作原理該儀器的操作是根據(jù)提取次數(shù)對試驗結(jié)果有極顯著性影響,加水量對試驗結(jié)果有熱解重量原理。開始儀器測量樣品重量,內(nèi)部的鹵素加熱單顯著性影響提取時間對試驗結(jié)果影響不大結(jié)合K值越大的元和水分蒸發(fā)器快速干燥樣品。在干燥過程中,儀器持續(xù)測工藝條件越有利于浸膏的提取,確定通痹膏提取條件量并顯示結(jié)果。干燥完成后,結(jié)果以水分含量%、干重%重為A3B2C3。量和回潮率%顯示。2.驗證實驗書干藝條件BC1進行驗證實驗兩2.3.2水分測定儀測量條件①溫度程序:階梯;②干燥溫次實驗平均結(jié)中國煤化工理想,說明該工藝度:0-4min,升至200℃,4min后降至105℃;③關(guān)閉模式:條簡單可行。CNMHG大規(guī)模生產(chǎn)。從60mn;④測量時間:5min。生產(chǎn)的綜合效益出發(fā),考慮到節(jié)能降耗、縮短生產(chǎn)周期等因2016年第37卷第6期云南中醫(yī)中藥雜志素,最終確定了各因素的最佳水平組合。煎煮。并且,藥材浸泡30min的吸水量,經(jīng)多次實驗驗證可忽28追加實驗90由直觀分析表和方差分析表可以看出,略不計。實驗結(jié)果顯示3個因素的最大K值都落在最高水平上,由于3.2評價指標的選擇通痹膏組方由將近20味藥材組成提取時間對實驗結(jié)果的影響沒有顯著性差異,所以對加水量組方復(fù)雜,且“君藥”均以粉末入藥,提取部分藥材多為“臣和提取次數(shù)這兩個因素分別進行追加實驗,即在最佳提取工佐、使”藥,含有10多味藥材,無法確定具體以哪一個有效成藝A3B2C3基礎(chǔ)上分別將加水量12倍換為14倍和將提取次分或有效部位作為評價指標,最終選擇水煎煮經(jīng)常采用的提數(shù)3次換成4次,2組實驗,分析結(jié)果見表4,圖1。取物干浸膏得率為評價指標。表4追加實驗結(jié)果比較表3.3最佳提取工藝的確定正交試驗的極差分析結(jié)果顯示3因素浸膏得率(%)個因素都落在最高水平上,只有加水量和提取次數(shù)對實驗有14倍量水17.861顯著性影響,而提取時間對實驗無顯著性影響。所以就在加提取4次17.90水量和提取次數(shù)上對實驗進行追加,結(jié)果顯示與最佳提取工藝(A3B2C3)無顯著差性異,再從生產(chǎn)的綜合效益出發(fā),考慮42086到節(jié)能降耗、縮短生產(chǎn)周期等因素,最終確定各因素的最佳水平組合為A3B2C3。為醫(yī)院制劑通痹膏的申報和生產(chǎn)提供了相應(yīng)依據(jù)。參考文獻[1]柯年美柯暉,王小云.痹證的中醫(yī)治法及常用治痹中藥的功效與加81012提21.52運用比較[].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2007,25(1):141-142[2]宣偉東,袁志仙,成熙.正交試驗法優(yōu)選生姜抗暈?zāi)z膏劑的制備工藝[冂].中國實驗方劑學(xué)雜志,2013,19(7):53-5圖1效應(yīng)曲線圖[3]熊迎春.正交試驗法優(yōu)選止痛消炎膏提取工藝[J]中國現(xiàn)代藥物由表4可以看出,14倍量水和提取4次2組實驗的浸膏應(yīng)用,2010,4(13):97-98得率與2次驗證實驗的平均浸膏得率17.297%相比并無顯著[4]鐘小群李艷王麗靜等.正交試驗優(yōu)選豐城雞血藤的提取工藝差異,結(jié)合圖1,可以看出,加水量10倍以上變化趨勢漸緩,提研究[J中草藥,2009,40(7):106-1068取次數(shù)趨勢變化也放緩綜合考慮實驗的嚴謹性、實際生產(chǎn)的5]李克王曙東吳龍琴等多因素正交試驗法優(yōu)化忍冬藤提取工合理性,多次提取有可能含大量雜質(zhì),所以就不再繼續(xù)追加實藝研究[門].現(xiàn)代中藥研究與實踐,2013,27(20):39-41.驗,確定最佳提取工藝為A3B2C3[6]許樹軍鄒淑君,王冬梅,等.桂苓五味甘草湯煎膏劑提取工藝研3討論究[J].中醫(yī)藥學(xué)報,2012,40(3):115-117[7]趙劍,蒲清榮,陳玉蘭,等,腎纖康顆粒水提取工藝研究[J].瀘州3.1提取方法的討論通痹膏是由忍冬藤、桂枝等中藥組醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2010,33(1):34-36成,其部分藥材為貴重藥材脂溶性有效成分含量較多,部分[8]趙劍,王橋,黃銳,等,正交試驗法優(yōu)選茵陳四苓顆粒水提工藝藥材為含有機酸類、皂苷類等極性較大有效成分,鑒于藥物的[J].瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2013,36(5):455-457主要化學(xué)成分的有效溶出,考慮了幾種提取方法,包括水提醇9]都述虎夏重道付鐵軍.龍薯橫總皂甙水解條件的優(yōu)化[J中成沉法、超聲提取、微波提取、乙醇回流提取、蒸餾法提取揮發(fā)藥,200,22(9):608-610油,因為是醫(yī)院制劑,儀器設(shè)備不足,沒有乙醇提取和回收裝[10]祝星富志軍,朱鵑等,巴布劑提取、工藝研究[J]海峽藥學(xué),置,結(jié)合臨床用藥方便及療效,最終選擇將貴重藥材和脂溶性012,24(8):46-49有效成分含量較多藥材打粉,含極性較大有效成分藥材用水(收稿日期:2016-04-15)歡迎使用電子郵件投稿E-mail: yzyy@ chinajoy中國煤化工CNMHGKMKxKa