中國輸血雜志2004年10月第17卷第5期 Chin J Blood Transfusion, October,2004,vo17,No.5低溫乙醇蛋白分離法中乙醇的質量控制周仁花(廣東衛(wèi)倫生物制藥有限公司,廣東汕頭515071)關鍵詞:蛋白分離乙醇法質量控制中圖分類號:R392.33TQ23.12+2文獻標識碼:C文章編號:1004-549X(2004)-05-039002低溫乙醇分離法是十九世紀40年代創(chuàng)建的一種血漿蛋同管理好、距離近的原則。特別注意綜合考慮價格和質量白分離純化的生化技術口,乙醇作為一種蛋白沉淀劑,具有避免簡單采用比價采購給企業(yè)帶來的質量風險。根據乙醇許多優(yōu)點:介電常數低、與水易混溶、在正常環(huán)境和工作條件市場供應情況,一般可以保持2~3家供貨單位以保證供應下無易爆性、低分子量、化學上的相對惰性、低毒、價廉、易得的可靠性,有利于產品質量的持續(xù)改進和提高和抑菌作用。至今,大規(guī)模血漿蛋白分離仍基本采用低溫乙14有特殊質量要求時,可先向供貨單位提出,并寫入合同醇分離法。乙醇作為低溫蛋白分離法中的主要物料,用量非條款中。常大,對它的質量控制不好,關系到制品的質量,可能表現在制品的安全性穩(wěn)定性澄明度、收率等方面。筆者就曾遇到2抽樣檢驗的乙醇質控問題,提出來與同道探討對供貨單位產品乙醇的檢驗是保證外購乙醇質量的重1控制好進貨渠道要手段,進廠檢驗的目的是防止不合格乙醇流入生產流程造成不必要的損失。被抽樣的乙醇必須均勻一致,并具有代表1.1質量管理部門應對供貨單位進行質量評估,合格后方性,對抽取的乙醇嚴格按《中國藥典》或《中國生物制品主要可進貨。供貨單位應具備《營業(yè)執(zhí)照》、《藥品生產許可證》和原輔材料質量控制標準》(2000年版)要求逐項全檢,合格《乙醇(藥用級)的生產批件》,生產范圍應有乙醇(藥用級)。后,方可放發(fā)使用。本公司1999年生產的一批人血白蛋白供貨單位的人員、廠房、設施、設備、衛(wèi)生能符合乙醇生產和(批號9906104)外觀有嚴重乳光,經調查發(fā)現在生產過程質量要求,質量保證體系完善,特別對運輸設備不能忽視,應中,配制乙醇時發(fā)現有乳光的異常情況,當時未引起重視,繼使用專一的運輸設備,不能與其他化學試劑共用續(xù)加工,到成品分裝后才發(fā)現問題,及時更換其它批號的乙1.2供應單位一經選定,應盡可能減少變更,需要變更時,醇后,白蛋白的外觀即得到解決。事后將此批(990510)乙醇必須經質量管理部門審查,批準。配制成不同濃度與另兩批藥用乙醇比較分析、檢測濁度,見1.3選定供貨單位,應遵循高質量、低價格、守信用、重合表1。表1不同批次、不同濃度乙醇的濁度比較本底12%20%(加鹽)20%40%(加鹽)9905109906182.82.92.3.2990630導致白蛋白外觀有嚴重乳光的乙醇批次從上表數據推測可能是某種水不溶物污染了乙醇,污染途徑可能是運輸過程中盛裝的容器不潔凈,但在常規(guī)檢測中3對乙醇質量的驗證又難以發(fā)現因此根據生產需要還應增加以下監(jiān)控內容:①確定樣品符合要求后,由于檢測項目有限,是否適用于根據生產需要可把乙醇稀釋成生產所需的不同濃度,檢測濁生產,生產部門還必須采用供貨單位提供的乙醇作試生產驗度,尤其是配制20%乙醇和40%乙醇時更要慎重;②防止生證,尤其是新的供應商或者原有的供貨單位長時間停止供貨產的制品免受污染,可對乙醇作氣相分析,與分析純乙醇圖后又恢復供貨的情況下,更需要對它們提供的乙醇進行驗譜比較;③生產企業(yè)的生產操作人員及質量監(jiān)督人員應對新證,通過對制品質量的全面考察來評價乙醇的質量情況。購入的乙醇按工藝中所需要的各種乙醇濃度進行配制后檢查其澄明度,并以此作為生產過程的質量控制點。生產人員有選用能穩(wěn)定地滿足生產和產品質量標準要求的乙醇,才能和管理人員對所購入的乙醇在使用過程中發(fā)現任何異常情保證制品質量的穩(wěn)定,因此必須做好乙醇的驗證工作,況后,必須立即上報質管部門4乙醇貯存系統(tǒng)的清洗乙醇在貯存過程中會析出一些不溶性絮狀物,應定期清中國輸血雜志2004年10月第17卷第5期 Chin J Blood Transfusion, October,2004Vol.17,No.5391·洗,包括管道輸送系統(tǒng),在生產中發(fā)現,用水清洗后,還必須再用乙醇循環(huán)沖洗,否則管道開始放出的乙醇對制品澄明度爭考文獻也有一定的影響。1 CohnEJ et al. Preparation and properties of serum and plasma總之,對乙醇的質量控制工作應該從過去的主要依靠人proteins. iv. a system for the separation into fractions of the pro-廠抽樣質量檢驗的階段向前邁進一步,進入全面質量控制階tein and lipoprotein components of biological tissues and fluids .J段,實現QC模式向QA模式的轉變,QA部門要對其整個過Amchem Soc, 1946, 68:459程進行質量控制和正確、有效地監(jiān)督。同時,生產部門配合2繆德驊主編.藥品生產質量管理規(guī)范實施指南(201年版).北質量管理部門做好其驗證工作,以確保制品的安全性、穩(wěn)定京:中國化學制藥工業(yè)協(xié)會,2001,46~53性和有效性,降低生產企業(yè)成本、提高經濟效益和維護人民(2003-07-28收稿,200405-28修回)的生命安全。本文編輯:劉曉明用自動化微板法初篩RhD血型建立RhD陰性庫王秀風馬振東王獻芳(廊坊市中心血站,河北廊坊065000關鍵詞:Rh血型微板法中圖分類號:R457.1+1文獻標識碼:B文章編號:1004-549X(2004)05-039102試管法篩查與鑒定RhD血型,存在操作步驟繁瑣,人為照,從而判定待測微孔是否存在凝集。因素影響較大,且結果只能當時憑肉眼判斷,無法使結果數據化的不足。本血站于2003年1月建立了RhD血型大規(guī)2結果及分析模初篩的自動化操作方法,使RhD血型初篩納入了獻血者經微板篩查,RhD陰性標本34份。采用了多克隆抗D初篩的常規(guī)檢測項目。血清(單克隆lgM和多克隆IgG,涵蓋范圍廣泛,對D抗原和部分弱D抗原均可產生較好的凝集反應1)排除假陰性。對1材料與方法所有微板RhD陰性標本均進行間接抗球蛋白試驗,有效防1.1標本本站獻血者ACD抗凝新鮮標本8603份止了D型的漏檢。發(fā)現RhD33份,D"1份,RhD陰性符合1.2試劑抗D血清(lgM+lgG型)(Baso)率為97.1%。1.3儀器自動加樣系統(tǒng)(RSP150,瑞士 TECAN)和HEI通過對RhD血型大規(guī)模的初篩,為固定的無償獻血者DOLPH溫育振蕩器( TITRAMAX1000,德國);TL5.0型平建立了ABO、RhD血型檔案,保證了稀有血液的利用。也使板離心機(上海);微孔U型板。檢測過程程序化,判讀標準化,結果數據化,有效地排除了人1.4方法將ACD抗凝血3500r/min離心75min后啟動為干擾,處理96人份標本只需25min,大大提高了工作效率。RSP控制軟件 Logic,取0.9%NaC1200dl待測RBC10μl加參考文獻至預稀釋板混勻取稀釋好的5%RBC懸液30μ1加至U型板中再加入301抗D1血清。2℃溫育振蕩6min,頻率為1呂鵬主編,最新輸血技術學,北京:人民衛(wèi)生出版社,194,395500/min,平板離心機離心1000r/min,2min,振蕩30s,頻率800/min,在波長620nm下,判讀反應結果2 Zhiburt EB, Andreeva LS, Savel eva LP, et al. 2-stage determi-1.5判讀啟動計算機進入 Platemate for windows凝集模nation of Rhesus classification Klin Lab Diagn, 1996,(3):29塊讀板程序后,酶標儀對待測微板96孔同時沿最大孔徑進(200305-18收稿,200403-11修回)行40點線性掃描,凝集孔和非凝集孔可獲得兩種不同的曲本文編輯:王良華線,程序自動選擇20點連成的曲線與參考曲線進行擬和對