●16●畜牧技術(shù)廣東畜牧獸醫(yī)科技2012年(第37卷)第2期中藥添加劑對海南文昌雞免疫功能的影響姚茂忠，陳湛娟”，馬建升”( 1.海南醫(yī)學(xué)院海南省藥物安全性評價研究中心，海南?？?71101; 2.海南師范大學(xué)化學(xué)與化工學(xué)院，海南?？?70216; 3.廣州龍沙有限公司，廣東廣州510288 )摘要:將180只雌性文昌雞隨機分為5組，每組3個重復(fù)，每重復(fù)12只。第1組為空白對照組，飼喂基礎(chǔ)日糧;第2組為抗生素對照組，在基礎(chǔ)日糧中按600 mg/kg 添加金霉素;第3、4、5組分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.1%、0. 2%和0. 3%的中藥添加劑。試驗共進行6 w，每周稱重，計量采食量。分別于28、35d時接種禽流感疫苗。第49 d、56 d時每組隨機取8只雞，翅靜脈采血制備血清，血凝抑制試驗檢測禽流感疫苗抗體滴度。56 d時將各組已采血8只雞屠宰后打開腹腔，取胸腺、法氏囊稱重并計算免疫器官指數(shù)。結(jié)果表明，0.2%中 藥添加劑能顯著提高文昌雞日增重(P<0.05)， 提高法氏囊指數(shù)(P<0. 05);0.2%和0.3%中藥添加劑均能提高禽流感疫苗抗體滴度(P<0.05).結(jié)果提示，本中藥添加劑能夠提高海南文昌雞生產(chǎn)性能和免疫功能。關(guān)鍵詞:中藥添加劑; 文昌雞;免疫功能;生產(chǎn)性能中圖分類號: S831.5文獻標(biāo)識碼: A文章編號: 1005-8567 (2012)02- -0016-04Effects of traditional chinese herb additive on the immune function ofHainan Wenchang chickenYao Maozhong', Chen Zhanjuan', Ma Jiansheng"( 1.Research Center for Drug Safety Evaluation of Hainan Province, Hainan Medical College, Haikou 571101,China; 2.Collegeof Chemistry and Chemical engineering, Hainan Normal University, Haikou 571158, China; 3.Guangzhou Lonza Co. LTD,Guangzhou 510288,China )Abstract: 180 female Wenchang chickens were randomly assigned to 5 gToups with 3 replications in eachgroup and 12 chickens in each replication. Diets containing 0, 600mg aureomyein, 0.1% TCMA, 0.2% TCMA or0.3% TCMA kg-1 were fed to group 1, group 2, group 3, group 4 or group 5 respectively. The test lasted for 6weeks. The body weight and feed intake of chicken were .measured per 7 days. All the chickens were inoculatedAvian Influenza vaccine twice at the age of 28 days and 35 days respectively. When they were 49 or 56 days old, 8chickens from each group were randomly selected to cllct blood samples respectively. Serum was separated andassessed for HI antibody titers to Avian Influenza vinus. At the age of 56 days, 8 chickens from each group whichwere collected blood samples were slaughtered to get thymus gland and bursa of fabricius. Then the organ weightwas got to calculate index of the immune organ. The results showed that the daily weight gain was improvedsignificantly in the group containing 0.2% TCMA (P <0.05), feed conversion ratio of 0.2% TCMA group wasdecreased ( P>0.05) and index of bursa of fabricius in the group of 0.2% TCMA was increased significantly(P<0.05). Avian Infuenza antibody titers was increased significantly in both 0.2% and 0.3% TCMA group (P<0.05). These results indicated that the immune function and the production performance of Hainan Wenchangchicken was increased.Key words: Traditional chinese medicine additive; Wenchang chicken; Immune function; Productionperformance中國煤化工MHCNMHG收稿日期:2012-01-31*:通訊作者中藥添加劑對海南文昌雞免疫功能的影響一姚茂忠，等畜牧技術(shù).17:海南文昌雞原產(chǎn)于海南省文昌市，是我國最1.2.2中 藥添加劑對海南文昌雞免疫功能影響佳肉用型地方雞種之- ,位居海南“四大名菜”之試驗首,因其皮薄、骨酥、肉質(zhì)細滑和肉味香濃等特性1.2.2.1 樣品采集于28 d.35 d時2次接種禽而聞名于世叫。中藥飼料添加劑具有安全無殘留流感滅活疫苗。試驗第49d、56d時每組隨機取等功效,為抗生素類化學(xué)添加劑的潛在替代品，其8只雞，翅靜脈采血3mL,傾斜試管,待血清析出對海南文昌雞免疫功能的影響,尚未見報道。本試后,迅速以3000 r/min 離心10 min, 取上清液，驗就-種中藥添加劑對文昌雞免疫功能影響作初置于冰箱內(nèi)-20。C保存?zhèn)溆谩?6 d時將各組采血步研究，為其替代抗生素應(yīng)用于海南文昌雞的生8只雞屠宰后打開腹腔,取出胸腺(去結(jié)締組織、產(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)。脂肪)、法氏囊。1材料與方法.1.2.2.2免疫器官指數(shù)測定取出 胸腺和法氏囊1.1 材料后即刻稱重。計算器官系數(shù)。器官指數(shù)=器官重量1.1.1中 藥添加劑由神 曲、大蒜、女貞子、淫羊(mg)/體重(g)。藿等組成。經(jīng)40目粉碎后,按照比例配制,蒸餾水1.2.2.3禽流感疫 苗抗體滴度測定將待測血清浸提，減壓濃縮,干燥后冷藏備用。于56 C水浴滅活補體。96孔“V”型反應(yīng)板的第11.1.2試劑與藥品禽流感疫苗 (H;亞型,N,株)孔內(nèi)加入0. 9%生理鹽水175 μL，第10孔內(nèi)加購自內(nèi)蒙古生物藥品廠;禽流感Hs亞型抗原購自.入生理鹽水50 μL， 其余每孔加生理鹽水25中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所。μL。取待測血清25 μL,加入第1孔，混勻,取1.2 方法.25 μL加入第11孔，并棄去125 μL。 另取251.2.1中 藥添加劑對海南文昌雞生產(chǎn)性能影響試μL加入第2孔，混勻后依次作倍比稀釋至第9驗1 d雌性文昌雞180只，采用基礎(chǔ)日糧育雛2孔,從第9孔取25 uL棄去。將4單位禽流感抗w后，按體重隨機分成5組,每組3個重復(fù),每個重原25加入除 10、11孔外其余各孔中。放微量復(fù)12只雞。第1組為空白對照組,飼喂基礎(chǔ)日糧;震蕩器.上震蕩2 min, 室溫下感作30 min,然后每第2組為抗生素對照組，在基礎(chǔ)8糧中添加600孔加入1%雞紅細胞25 μL。 再放微量震蕩器上mg/kg的金霉素;第3、4、5組分別在基礎(chǔ)日糧中添震蕩2 min,室溫感作30 min 左右觀察。加0. 1%、0.2%和0. 3%的中藥添加劑。網(wǎng)籠飼養(yǎng)，2結(jié)果自由采食、自由飲水,常規(guī)免疫。試驗共進行6 w,2.1中藥添加劑對海南文昌雞生產(chǎn)性能的影響每周稱重?；A(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)水平見表1。如表2,整個試驗期間,第4組平均日增重比表1基礎(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)水平第1組提高7.59%(P<0.05),表明0.2%的添加.量效果明顯,第3組、第5組與第1組相比均無顯日糧配比(%)組成0-4周4-8周營養(yǎng)水平著性差異;與第2組相比,第3組、第5組日增重玉米58.00 61.59 代謝能(MJ/kg) 12.19 12. 76均顯著性降低(P<0.05),但第4組與第2組間無油脂2.52 3.50 粗蛋白(%)21.24 19. 56顯著性差異,表明第4組(0.2%添加組)提高日增進口魚粉4. 003. 00鈣(%)1. 070.93重作用與抗生素(金霉素)近似。第3組料重比比大豆粕26.62 24.50 有效磷 (%)0.470. 42第1組稍有升高，第4組和第5組分別降低花生粕.5.004.00蛋+ 胱(%)0.88 0.738. 07%和4. 35%,但差異不顯著(P>0.05);與第CaHPO,1.401.30賴氨酸 (%)1. 100. 96石粉1. 401.20 NaC1(%)0.370. 352組相比,第3組、第4組和第5組則分別升高，但差異不顯著(P>0.05)。NaCl0.31Met0.210.102.2中藥中國煤化工功能的影響Lys0. 0402.2.1對免YHCNMH G表3，與第1預(yù)混料0. 50組相比，第3.4和5組胸腺指數(shù)均升高,但差異不合計100.00 100. 00顯著(P>0. 05),第3.4和5組胸腺指數(shù)均低于第●18.畜牧技術(shù)中藥添加劑對海南文昌雞免疫功能的影響一姚茂忠，等2組(P>0.05)。表明中藥添加劑能夠提高胸腺指體矮小、體寬、羽色深、性早熟等熱帶特征四。其以體數(shù);第3、4和5組法氏囊指數(shù)分別比第1組提高型圓小、早熟易肥、皮薄骨酥、肉質(zhì)滑嫩、肉味香濃11. 84%(P>0.05)、25.30 (P<0. 05)和17. 55%的特色回,不僅享譽于海南、廣東、廣西、香港和澳(P>0.05),表明中藥添加劑能夠顯著提高法氏囊門，且外銷至東南亞的新加坡、馬來西亞等地。為保指數(shù)。護具備海南島熱帶生物資源特色的文昌雞，開發(fā)綠表2中藥添加劑對文昌雞生產(chǎn)性能的影響色高效中藥飼料添加劑以保證食品安全,不僅具備經(jīng)濟效果,且具有重要的社會和科學(xué)意義。組別日增重(g/d)料重比中藥飼料添加劑提高肉雞的生產(chǎn)性能作用，10.15士0. 1203. 22士0. 18*在快大型肉雞上研究較多1h5] ,但其對于肉質(zhì)鮮美,211. 01士0. 25°2. 85士0.09b深受國內(nèi)外市場青睞的海南文昌雞的作用，尚未9. 92士0.24*3. 34士0. 07*10. 92士0. 08m2. 96士0. 214見研究報道。本試驗發(fā)現(xiàn),中藥添加劑0.2%的添10. 46士0. 12曲3. 08士0.12*加量能夠降低文昌雞料重比，并提高日增重達到1):同列肩注不同者表示差異顯著(P<0.05),下同。顯著水平(P<0.05) ,提高生產(chǎn)性能作用與抗生素近似。表3中藥添加劑對海南文昌雞免疫器官指數(shù)的影響免疫器官作為機體免疫力的物質(zhì)基礎(chǔ)，在動胸腺(mg/g)法氏囊(mg/g)物免疫力中發(fā)揮著巨大的作用。胸腺和法氏囊是5. 01士1.89*2. 45士1. 28*雞的重要免疫器官。有學(xué)者報道,復(fù)方中草藥添加6. 18士2. 11*2. 40士1. 12#劑能夠顯著提高雞胸腺和法氏囊指數(shù)回,本中藥5.40士1.40*2. 74士0. 86*添加劑能夠提高文昌雞胸腺指數(shù)，且能顯著升高5. 19土0. 91*3.07士1. 75°法氏囊指數(shù)(P<0.05),表明其能促進文昌雞免疫5. 88士3.20*2. 88士0. 6°器官的生長發(fā)育,進而提高雞的免疫力。對于中藥2.2.2對禽流感疫苗抗體滴度影響如表 4,第飼料添加劑的免疫增效增效作用，有研究發(fā)現(xiàn)中49 d時,第3.4、5組分別與第1組和第2組相草藥添加劑能夠促進雞新城疫抗體效價[.7],但中比,抗體滴度均提高,其中第5組均達到顯著水平藥添加劑對于應(yīng)用于文昌雞的禽流感疫苗的免(P<0.05);第56 d時,第3.4、5組分別與第1組疫增效作用,鮮見報道。本研究發(fā)現(xiàn),0.2%和0.3%和第2組相比,抗體滴度均提高，其中第4、5組均的中藥添加劑能夠顯蓍提高禽流感疫苗抗體效達到顯著水平(P<0.05);第3.4.5組抗體滴度從價(P<0.05),表明其具備對禽流感疫苗的免疫第49 d到56 d有升高的趨勢。表明中藥添加劑增效作用。已有研究認為女貞子、淫羊藿具有提具備提高禽流感疫苗抗體滴度的功能。高動物免疫力的功能(8.9,本中藥添加劑組分中含表4中藥添加劑對海南文昌雞禽流感疫苗抗體滴度的影響女貞子和淫羊藿,其所含的多糖、黃酮、皂甙類有效成分可能為其對禽流感疫苗免疫增效作用的49 d抗體滴度(log)56 d抗體滴度(log)物質(zhì)基礎(chǔ)。5. 32士0.19*5. 38士0. 60*5. 32士0. 33*5.54士0. 60°本研究結(jié)果表明,0.2%的中藥添加劑不僅能35. 46士0. 26*5. 95士0.55%促進文昌雞生產(chǎn)性能，而且能提高文昌雞免疫功45. 75士0.30*6.78士0.40能，具備作為抗生素替代品應(yīng)用于文昌雞飼料的56. 83士0.31b7. 12士0. 37°潛力。故值得對中藥添加劑應(yīng)用于海南文昌雞生產(chǎn)的可行性做深入研究。3討論中國煤化工海南島屬熱帶和亞熱帶季風(fēng)氣候，四面環(huán)海，參考文.MHCN MHG自然環(huán)境相對封閉，特有的自然地理、生態(tài)環(huán)境條件和長期的封閉狀態(tài)，形成了海南文昌雞生長慢、能蛋白質(zhì)水平的研究[J].熱帶農(nóng)業(yè)工程, 2009, 33(2) :4-6.中藥添加劑對海南文昌雞免疫功能的影響一-姚茂忠，等畜牧技術(shù)19●[2]耿照玉, 張云芳.海南文昌雞若干種質(zhì)特征和遺傳多樣性研生長性能和免疫功能的影響[J].中國畜牧善醫(yī)，2011, 38(8):究[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報, 2003, 14(4) :562-564.16-18.[3]于吉英,陳寬維,肖小君,等文昌雞產(chǎn)蛋性能及蛋品質(zhì)研究[7] 戴必勝,蔣林,陳少雄.中草藥和蘆薈多糖對肉仔雞腸道微生[J].中國家禽, 2007, 29(13) :23-25.態(tài)、免疫功能及生產(chǎn)性能的影響[J].中國家禽, 2007, 29(16):[4]張美英,王志祥.山楂提取物對肉仔雞生產(chǎn)性能.養(yǎng)分消化率21-24.及消化酶酶活的影響[J].飼料工業(yè), 2009, 30(14) :7-11.[8] 周紅波.氟苯尼考和中草藥黃芪淫羊蕾合劑對雞體液免疫反[5]雷小軍,段小衛(wèi)中草藥飼料添加劑對肉仔雞生長性能和免疫應(yīng)的影響[D].武漢:華中農(nóng)業(yè)大學(xué), 2003.器官指數(shù)的影響[J].畜牧與飼料科學(xué), 2010,31 (5) :42- 44.[9]趙興中草藥提取物對肉仔雞生產(chǎn)性能及部分血液生理生化[6} 吳植,袁維峰,周廣生,等.復(fù)方中草藥添加劑對林下生態(tài)雞指標(biāo)的影響[D].烏魯木齊:新疆農(nóng)業(yè)大學(xué), 2003.********** * ******** * ******** ** * ******** *******(. 上接第 15頁)影響。周齡過渡到29- -35周齡,青腳麻雞所產(chǎn)種蛋的孵化4小結(jié)性能提高。Alsobayel報道產(chǎn)蛋母雞在7-11月齡本試驗結(jié)果顯示，青腳麻種雞父母代在時種蛋受精率、受精蛋孵化率和胚胎死亡率均無明29-35周齡時所產(chǎn)種蛋受精率及孵化性能較好，顯差異，本次試驗的結(jié)果與其相一致。而A1-從24-28周齡過渡到29- -35 周齡，種蛋的受精率sobayel研究發(fā)現(xiàn)11-15月齡時則隨月齡增加受及孵化率有明顯的提高。在43周齡到淘汰時種蛋精率和受精蛋孵化率明顯逐步降低,死胚率逐步增受精率較低。青腳麻雞種蛋在秋季的孵化性能較加,但是在本試驗中,43周齡后種蛋的受精率有明好,春季最差。綜合季節(jié)和不同種雞日齡的影響，顯的降低，但是受精蛋孵化率并沒有顯著的降低。秋季的29-35周齡的青腳麻雞種蛋孵化性能最王和中等lL5對種蛋受精率和受精蛋孵化率的研究好,而春季的老齡青腳麻雞種蛋孵化性能最差。在中發(fā)現(xiàn),種蛋受精率與受精蛋孵化率有一定的相關(guān)生產(chǎn)實踐中,我們要注意及時淘汰老齡雞,充分利性,種蛋受精率高時,孵化率也高,種蛋受精率低用29-35周齡的青腳麻雞所產(chǎn)的種蛋，并在這個時，受精率也低。本試驗D組的種蛋受精率低,但其階段加強雞的飼養(yǎng)管理,以達到最大的經(jīng)濟效益。受精蛋孵化率并沒有相應(yīng)降低,這可能與試驗種雞在不同的季節(jié),要注意控制雞舍的環(huán)境溫度,使雞的品種、營養(yǎng)水平、健康狀況、孵化技術(shù)水平及條件少受環(huán)境溫度的應(yīng)激，達到最佳的孵化效果。以及種蛋品質(zhì)有關(guān)。3.2青腳麻雞產(chǎn)蛋不同季節(jié)與種蛋孵化率的關(guān)參考文獻:系分析[1]何艷麗,吳鏑:美國七彩雉雞的產(chǎn)蛋周齡與種蛋受精率和孵化從本實驗可以看出,季節(jié)對青腳麻雞種蛋的孵率的相關(guān)性分析[J].特產(chǎn)研究, 1997 (3) :53-54.化性能有- - -定的影響。本試驗中,春季的孵化性能[2]劉愛巧.蛋種雞產(chǎn)蛋期不同階段對種蛋孵化性能的影響[J].中國家禽, 2010, 32(16) :52-54.較其他季節(jié)差，秋季的孵化性能較其他季節(jié)好,氣[3] Alsobayel A A. Effect of protein rearing diet and age溫較高的夏季孵化性能較差。本試驗與陸雪林6對fertility and hatchabilky parameters of Saudi Arabian羅曼種雞孵化性能的研究結(jié)果基本-致，但是陸B(tài)aladi chickens[J]. Journal of King Saud University,雪林等發(fā)現(xiàn)春秋兩季羅曼種雞的孵化性能較夏1992, 4(1) :47-54.冬兩季好。本試驗卻發(fā)現(xiàn)春季的孵化性能較夏冬[4]王和中.淺析種蛋受精率與受精蛋孵化率的關(guān)系[J].江西畜牧獸醫(yī)雜志, 2006(4) :19.兩季都較差,這可能與重慶地區(qū)特殊的氣候環(huán)境[5]沈東,陶秀利.種蛋受精率與受精蛋孵化率的相關(guān)性討論[J].上有關(guān)。重慶處于我國西南方春季的氣溫比其他海畜牧通中國煤化工地區(qū)高,春季時間較短。特別是2010年,重慶春[6]陸雪林.不THCNMH G影響[J].山東家季整體氣溫波動很大,極端最高氣溫為40. 3 C,禽, 2001 (3":7-9.極端最低氣溫為-0.6 C,對本試驗也有- -定的