J. SHANXI AGRIC UNIV (Natural Science Edition)茸大學(xué)(自然科學(xué)版)2082(002376納豆及其提取物生物活性物質(zhì)測定段智變1,董改香2,溫曉慶2,江漢湖3(1.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,山西太谷030801,2.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院,山西太谷030801;3南京農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院,江蘇南京210095)要:用紫外分光光度法、高效液相色譜法等方法分析納丘及其提取物中皂武、異黃酮及蛋白質(zhì)含量。結(jié)果表明:與熟大豆相比,納豆中大豆甙元、染料木素、皂甙及蛋白質(zhì)等生物活性物質(zhì)含量增高。威熟納丘異黃酮總量、大豆甙元及染料木素含量分別是熟大丘含量的1.08倍、23.59倍和19.43倍,其中,成熟納豆總異黃酮中異黃酮武元的比例達81.55%。納豆生物活性咸分是其保健功能的物質(zhì)基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞:納丘;提取物;生物活性物質(zhì)中圖分類號:R151.2文獻標識碼:A文章編號:1671-8151(2008)020180-03Detection of the bioactive Substances in Natto and Its extractDUAN Zhi-bian et al(College of Life Science, Shanri Agricultural University, Taigu Shanri 030801, China)Abstract: The saponin, daidzein and genistein in natto was detected by ultraviolet spectroscopy and high performanceliquid chromatography, respectively. The results indicated that the contents of daidzein, genistein, saponin, protein in-creased after fermented by Bacillus subtilis natto. The contents of isoflavones, daidzein and genistein in ripe natto were1.08, 23. 59 and 19. 43 times than that in soybean respectively, and the aglycon content of genistein and daidzein is81.55% of natto isoflavones. The bioactive substances in natto were functional elementsKey Words: Natto: Extract, Bioactive substance成熟納豆中富含大豆皂甙、大豆甙元糖甙大豆→清洗、浸泡→高壓蒸煮→攤涼→接種(簡稱大豆甙)、大豆甙元、染料木素糖甙(簡稱→發(fā)酵→后熟→納豆,嚴格控制生產(chǎn)工藝條件,染料木甙)、染料木素甙元(簡稱染料木素)等異保證產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。黃酮12及100多種酶等生物活性物質(zhì),它們是納1.1.4大豆異黃酮參考標樣豆保健功能的物質(zhì)基礎(chǔ)。不同的納豆產(chǎn)品,其中大豆甙元、染料木素由南京財經(jīng)大學(xué)工學(xué)院生物活性物質(zhì)的種類與含量會有很大差別4,食品科學(xué)與工程系糧油食品質(zhì)量檢測中心實驗室檢測納豆中相關(guān)生物活性物質(zhì)可為納豆的生物學(xué)分離制備功能研究提供理論依據(jù)12方法1.2.1納豆及大豆水提取物制備:1材料與方法納豆/大豆廉水提取物:取納豆/大豆200g,1.1材料粉碎,加滅菌生理鹽水200mL,攪拌,4℃靜置1.1.1納豆菌種過夜,2000r·min1離心20min,收集上清液。本實驗室分離、篩選高產(chǎn)菌株B.N.10納豆/大豆粒水提取物:取納豆/大豆2001.1.2熟大豆不粉碎,處理同上。大豆→清洗、浸泡→高壓蒸煮1.2.中國煤化工1.1.3納豆CNMHG甙元、染料木素收稿日期:200709-03修回日期:2007-0927作者簡介:段智變(1969-),女(漢),山西祁縣人,副教授,博士,主要從事益生菌保健及其生物學(xué)機理等方面的研究基金項目:山西省青年科學(xué)基金(20041036)段智變等:納豆及其提取物生物活性物質(zhì)測定181與皂甙含量測定見文獻。豆糜水提取異黃酮總量是納豆粒水提取物含量的1.33倍。2結(jié)果與分析2.3納豆、大豆及其提取物中大豆甙元含量2.1納豆、大豆及其水提取物蛋白質(zhì)含量納豆、大豆及其提取物中大豆甙元含量測定納豆、大豆及其水提取物的蛋白質(zhì)含量測定結(jié)果見圖3。成熟納豆粒大豆甙元含量分別是熟結(jié)果見圖1。納豆中蛋白質(zhì)含量為19.85%(濕大豆粒含量的2359倍;納豆糜水提取物大豆甙重),大豆中蛋白質(zhì)含量為18.05%(濕重),兩元含量分別是大豆糜水提取物含量的10.07倍;者差別不大,而納豆糜水提取物蛋白質(zhì)含量是大納豆粒水提取物大豆甙元含量分別是大豆粒水提豆糜水提取物含量的16.52倍,納豆粒水提取物取物含量的34.30倍;納豆糜水提取物大豆甙元蛋白質(zhì)含量是大豆粒水提取物含量的24.50倍,含量分別是納豆粒水提取物含量的1.33倍納豆糜水提取物蛋白質(zhì)含量是納豆粒水提取物含量的1.49倍,大豆糜水提取物蛋白質(zhì)含量是大豆粒水提取物含量的2.21倍。諷本水奏號本賣本雌短翻圖3納豆、大豆及其提取物中總異黃酮含量Fig 3 Isoflavones content of Natto, Soybeanand their extracts圖1納豆、大豆及其提取物中蛋白質(zhì)含量2.4納豆、大豆及其提取物中染料木素含量Fig 1 Protein content of Natto, Soybean and納豆、大豆及其提取物中染料木素含量測定their extracts結(jié)果見圖4。成熟納豆粒染料木素含量分別是熟大豆粒含量的1943倍;納豆糜水提取物染料木2.2納豆、大豆及其提取物中總異黃酮含量素含量分別是大豆糜水提取物含量的10.13倍納豆、大豆及其提取物中總異黃酮含量測定·納豆粒水提取物染料木素含量分別是大豆粒水提結(jié)果見圖2。成熟納豆粒異黃酮總量是熟大豆粒取物含量的31.71倍;納豆糜水提取物染料木素含量分別是納豆粒水提取物含量的1.33倍物水地阻水大水大物田2納豆、大豆及其提取物中總異黃酮含量魔水納以粒水大豆水大粒水Fig 2 Isoflavones content of Natto, Soybeaand their extracts中國煤化工染料木素含量Soybean and含量的1.08倍;納豆糜水提取物異黃酮總量是大CNMHG豆糜水提取物含量的1.15倍;納豆粒水提取物異黃酮總量是大豆粒水提取物含量的14.09倍;納以上對異黃酮的測定結(jié)果表明,浸泡后的熟山西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)2008大豆粒中大豆甙元、染料木素的含量分別為3討論22.15μg·g-、34.72g·g-2,總異黃酮含量為1361.08g·g1;成熟納豆粒中大豆甙元納豆是日本傳統(tǒng)發(fā)酵豆制品,現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)它具染料木素的含量分別為5243g·g-1、674.51有溶血栓、降血壓、心血管保護等功能。納pg·g1,總異黃酮含量為14617.65g·g-1。從豆中富含酪蛋白酶和胰酶等蛋白酶、y淀粉酶、以上數(shù)據(jù)可知:發(fā)酵前熟大豆總異黃酮中異黃酮纖維素酶、脂酶、植酸酶等100多種酶,一些蛋甙元的比例為4.18%,而發(fā)酵后成熟的納豆總異白酶可將納豆中的蛋白質(zhì)分解,使營養(yǎng)更易被吸黃酮中異黃酮甙元的比例達81.55%與未發(fā)酵收3,。納豆激酶是納豆菌在發(fā)酵大豆的過程中的大豆基質(zhì)相比,發(fā)酵后的納豆中大豆甙元、染分泌到細胞外的單鏈多肽絲氨酸蛋白酶,是溶血料木素的含量分別是發(fā)酵前的23.59倍、19.43栓功能的主要活性因子,納豆周圍的粘性物質(zhì)倍,總異黃酮含量增長了106.57μg·g-1。中還含有強活性的血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶抑制肽2.5納豆異黃酮甙元HPLC色譜圖本檢測結(jié)果表明,將納豆粉碎后提取,更有納豆酸水解后異黃酮甙元HPLC色譜圖見圖利于可溶性蛋白質(zhì)的浸出。濕重納豆與大豆中蛋5。納豆酸水解產(chǎn)物中含有保留時間為4.771、白質(zhì)含量分別為1985%、18.05%,兩者差別5.271、7.308min的組分,經(jīng)與標準圖譜對比不大,但其水提取液中的含量差別卻很大,納豆組分分別為大豆甙元、黃豆素、染料木素,所占糜水提取物蛋白質(zhì)含量是大豆糜水提取物含量的面積比例分別為23.36%、8.60%、65,23%16.52倍,納豆粒水提取物蛋白質(zhì)含量是大豆粒染料木素含量高。水提取物含量的24.5倍,表明納豆經(jīng)過發(fā)酵后蛋白質(zhì)易于透出,另一方面,通過機械磨碎也促進了蛋白的釋放,從而使粘性物質(zhì)中的可溶性蛋白質(zhì)、肽等含量明顯升高,這與其多種保健功能直接相關(guān)研究表明,納豆中含有異黃酮及皂甙,它們是納豆抗氧化、降血脂、抗腫瘤等功能的物質(zhì)基礎(chǔ)·2。納豆異黃酮以糖苷或游離的形式存在。研究表明,少孢根霉等一些微生物在發(fā)酵大豆過納豆酸水解后異黃酮甙元HPLC色譜圖程中,產(chǎn)生的P葡萄糖苷酶可將大豆甙和染料木HPLC chromatogram of Natto Aglycon甙上的β糖基切除,使大豆甙元和染料木素的含2.6納豆、大豆及其提取物中皂甙測定量提高0,納豆菌也有此功能11。納豆游離異納豆、大豆及其提取物中皂甙的吸光度值見黃酮對活性氧自由基具有解毒作用,對人體預(yù)防表1。納豆中皂甙含量均比大豆中含量高,納豆心血管病、抗癌、防止衰老有明顯療效)。其提取物中皂甙含量均比大豆提取物中含量高。納豆中的皂甙是其生物活性成分之一。研究褒1納豆、大豆及其提取物中皂甙的吸光度值表明,皂甙具有顯著的清除自由基、抗氧化和降ble 1 Absorbance of Saponin (205nm)in Natto, Soy-血脂等作用,還可抑制人類腫瘤細胞HCT15的bean and their extracts生長,對鼠白血病細胞YAC1的DNA合成有明樣品稀釋倍數(shù)(或濃度)吸光度值顯直接抑制作用,經(jīng)簡單擴散或主動轉(zhuǎn)運等方式( or concentration) of sampl205m)進入腫瘤細胞直接破壞了腫瘤細胞膜的結(jié)構(gòu),還納豆麋水提物可強烈地抑制血小板聚集,使抗凝作用加強,抑納豆粒水提物2.7778制纖維蛋白原向纖維蛋白的轉(zhuǎn)化,激活纖溶系統(tǒng),大豆糜水提物2.7655從而大豆粒水提物5倍2.653中國煤化工,納豆8g·L-12.8556物中皂甙含量2.6273均比大CNMHG,在整個發(fā)酵(下轉(zhuǎn)第215頁)楊麥生等:超聲波提取羽衣甘藍葉黃素的工藝研究究得出,超聲波提取羽衣甘藍葉黃素的最佳組合將該方法驗證用于工業(yè)化生產(chǎn),充分利用羽為A2BC2,即將真空冷凍干燥、60目粉碎的羽衣甘藍資源,降低生產(chǎn)成本,提高葉黃素產(chǎn)品產(chǎn)衣甘藍葉粉,在30℃、400W超聲波的條件下,量具有重要意義。由此可見,超聲波強化提取技利用四氫呋喃(10:1)、15%氫氧化鉀乙醇溶液術(shù)可作為羽衣甘藍提取的優(yōu)選技術(shù),具有廣闊的浸提皂化20min的處理,可以得到最高提取量。利用價值和應(yīng)用前景。[1]李式軍,劉風生,珍稀名優(yōu)蔬菜80種[M.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,1995:5457[2] Gsziano J M, Manson JE, Ridker P M, et al. p-Carotene and heartdisease []. 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