貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)2006 34(6)16~18Guizhou Agricultural Sciences[文章編號(hào)]1001 -3601( 2006 )06-0303-0016-03河南省蝙蝠科2種蝙蝠的核型研究余燕'2,馬金友' ,牛紅星’( 1.河南科技學(xué)院動(dòng)物科學(xué)系,新鄉(xiāng)453003 ;2.河南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,新鄉(xiāng)453007 )[摘要]采用取骨髓蒸汽固定法對(duì)河南省蝙蝠科2種蝙蝠的核型進(jìn)行了研究。結(jié)果:東亞蝙蝠的染色體數(shù)為2n=38,N.F=50與國(guó)外的研究一致而與金清波的研究迥異。東亞伏翼的染色體數(shù)為2n=26 N.F =44與印度小伏翼、伏翼及印度伏翼的核型非常相似屬于伏翼屬較為進(jìn)化的類群。[關(guān)鍵詞]核型;蝙蝠科;蝙蝠;河南[中圖分類號(hào)] 0Q959. 833[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]AKaryotypes of V. superans and P. abramus in HenanYU Yan'2 , MA Jin-you' , NIU Hong-xing2( 1. Department of Animal Sciences , Henan Science and Technology College , Xinxiang 453003 ;2. College of LifeSciences , Henan Normal University , Xinxiang 453007 , China )Abstract : The karyotypes of V. superans and P. abramus in Henan were studied by the bone marrow cell and steam-fixationmethod. The results show that the diploid chromosome number of V. superans is 38 , which is the same as the results studied by foreignresearches and different from that reported by JIN Qing-bo , and the diploid chromosome number of P. abramus is 26 , which is similarwith the karyotypes of P. mimus P. pipistrellus and P. coromandra and belongs to a more developed group in Pipitrellus.Key words : karyotype ; vespertilionidae ; bat ; Henan蝙蝠是翼手目( Chirptera )動(dòng)物的俗稱是哺乳而且還減少了由于使用大量農(nóng)藥所造成的環(huán)境污類中分布最廣、數(shù)量 最多的動(dòng)物之一。絕大多數(shù)蝙染。另外;蝙蝠的排泄物還是-種經(jīng)濟(jì)、優(yōu)質(zhì)的農(nóng)業(yè)蝠捕食昆蟲,它們是數(shù)量巨大的夜行性昆蟲(包括肥料。對(duì)河南省蝙蝠的研究除周家興等31、金蚊、蛾及許多鞘翅目害蟲)最重要的控制者。研清波等4]、宋朝樞和瞿文元等S]在相關(guān)論文和調(diào)究表明,1只蝙蝠每個(gè)夜晚能吃掉相當(dāng)于自身重量查集里零星報(bào)道外至今尚無人對(duì)其進(jìn)行專門研究。1/3的昆蟲,即1只20g的蝙蝠1夜可吃掉200~為此,1000只昆蟲[2。這不僅有利于農(nóng)林業(yè)的健康發(fā)展，[收稿日期] 2006-05-09 ; 2006-08-28 修回[基金項(xiàng)目]河南省科技攻關(guān)項(xiàng)目資助0224070051 )河南省動(dòng)物學(xué)省級(jí)重點(diǎn)學(xué)科資助[作者簡(jiǎn)介]余燕( 1972- )女碩士,講師從事動(dòng)物學(xué)研究。*通訊作者不發(fā)達(dá)我們認(rèn)為輸卵管腺與分泌細(xì)胞所分泌的輸blastocyst stage with oviductal tssue or in conditioned medium卵管液有限。除為受精卵提供少量的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外,[ J ]. Reprod Fertil ,1989( 85 ) 715-720.主要是為受精卵的分裂、發(fā)育和運(yùn)行創(chuàng)造一個(gè)適宜[ 6 ] Hadj K ,Abdelhaq A ,Ahmed T. Production of dromedary embryosby IVM and IVF and co-culture with oviductal or gmulosa cells的微環(huán)境。[ J] Theriogenology 2004( 62 ) 1175-1185..[7]北京農(nóng)業(yè)大學(xué).家畜組織學(xué)與胚胎學(xué)[M]北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出[參考文獻(xiàn)]版社,1982 234-235.[1]成勇鞠輝明李峰等.新鮮山羊輸卵管液對(duì)體細(xì)胞克[8]沈霞芬.家畜組織學(xué)與胚胎學(xué)[M]北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,隆和轉(zhuǎn)基因胚胎體外發(fā)育的影響J].揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與2001 209-210.生命科學(xué)版) 2005 26(2)37-40.[9]中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué).家畜繁殖學(xué)[M]北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,[ 2 ] Abe H Sendai Y SatohT et al. Secretory products of bovine ovi-2000 17-18.ductal epithelial cells support viability and mortality of bovine[ 10] Horst-Dieter Dellmann ,Esther M. Brown. Textbook of Veterinaryspermatozoa in culture in vitnc[ J] Exp Zool 199( 272 ) 54-61.Histology[ M ] United States of America 1981 322 -324.[ 3 ] KimN H Funahashi H Abeydeera L R et al. 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Co-culture of early cattle embryos to the第6期余燕等河南省蝙蝠科2種蝙蝠的核型研究7.作者對(duì)河南省蝙蝠科2種蝙蝠即東亞蝙蝠(Vesper-固定液I加入新鮮固定液II(無水乙醇:冰醋酸t(yī)ilio superans )東亞伏翼( Pipistellus abramus )的核=1: 2) ,固定15 ~ 30min。 ( 6 )取出載玻片,用新型進(jìn)行了研究。配的固定液II輕輕沖掉低滲液放置在空氣中干燥,以5%的Giemsa( 0. 2 mol/L磷酸緩沖液配制,pH 6.1材料與方法8 )染色8 min蒸餾水沖洗晾干。1.1材料在顯微鏡下選取染色體分散好的細(xì)胞100個(gè)以東亞蝙蝠1雄于2003年7月采自河南科技學(xué)上統(tǒng)計(jì)染色體數(shù)目確定2眾數(shù)。每種選10個(gè)著院院內(nèi)東亞伏翼2雌于2004年8月采自信陽縣絲粒清晰、分散好、背景清晰、染色體平直的中期分農(nóng)家屋檐下。以上個(gè)體均為性成熟個(gè)體。裂相拍照后放大并測(cè)量,計(jì)算出每- -染色體的相對(duì)1.2方法長(zhǎng)度和臂比根據(jù)Levan等81的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行染色體分染色體制備參考吳政安的蒸汽固定法7]并作類依染色體的長(zhǎng)度和著絲粒位置將染色體配對(duì)、編適當(dāng)改進(jìn)。( 1 )蝙蝠采回后立即將每只蝙蝠按號(hào)得到核型圖。2μg/g的劑量腹腔注射0.02%秋水仙素4h后取蝙2結(jié)果蝠前臂長(zhǎng)骨。(2)在培養(yǎng)皿中放入玻璃棒,在玻璃棒上放潔凈的載玻片。( 3 )用蒸餾水沖去長(zhǎng)骨上附觀察蝙蝠科2種蝙蝠骨髓細(xì)胞中期分裂相統(tǒng)著的血液,吸低滲液將長(zhǎng)骨骨髓吹散于載玻片上。計(jì)結(jié)果(表1)2種蝙蝠的染色體測(cè)量數(shù)據(jù)見表2,(4)向培養(yǎng)皿中加新鮮的固定液I(無水乙醇:冰核型見圖示。醋酸:蒸餾水=1:2:3),固定2~3h。(5)吸出表12 種蝙蝠的染色體數(shù)目Table 1 The diploid chronomne number of two bats .種名觀察細(xì)胞數(shù)二倍染色體數(shù)No. of diploid chromosome染色體眾數(shù)% )Specifie nameNo. of cells observed:38=38>38<26=26> 26Model counts東亞蝙蝠 V. superans10r8東亞伏翼P. abramus888》888能裁88888..BA.東亞蝙蝠中期分裂相B.東亞蝙蝠核型圖箭頭所示為次縊痕A.東亞伏翼中期分裂相B.東亞伏翼核型圖.A. The metaphase of V. superans B. The karyotype of of V. super-A. The metaphase of P. abramus ，ans , Secondary constriction is indicated by the arrow.B. The karyotype of P. abramus圖示東亞蝙蝠和東亞伏翼的中期分裂相及核型圖rig. The melaphase and the karyotype of V. supeans and P. bramus東亞蝙蝠:觀察統(tǒng)計(jì)了東亞蝙蝠132個(gè)中期分( 圖示右)。參考同屬的其它蝙蝠推斷X染色體是裂細(xì)胞其中108個(gè)細(xì)胞有38條染色體即2n眾數(shù)較大的端著絲粒染色體。是38( 108/132 x100% =82% )故該種蝙蝠的染色體數(shù)是2n=38。在18對(duì)常染色體中,有6對(duì)大型3討論中部著絲粒染色體,-對(duì)小型亞中部著絲粒染色體,東亞蝙蝠(V.superans)的染色體數(shù)2n=38其余為大小依次遞減的端部著絲粒染色體,N.F=N.F=50與Oh[9]報(bào)道的同種蝙蝠的核型相同,即50(圖示左)其中,No.8有明顯的次縊痕,X染色體在18對(duì)常染色體中,有6對(duì)大型中部著絲粒染色為-中等大小的中部著絲粒染色體,Y染色體為一體,-對(duì)小型亞中部著絲粒染色體其余為大小依次小的端部著絲粒染色體。遞減的端部著絲粒染色體。其中,No.8有明顯的次東亞伏翼:共觀察統(tǒng)計(jì)了110個(gè)中期分裂細(xì)胞,縊痕中國(guó)煤化工的中部著絲粒染色體,其中98個(gè)細(xì)胞有26條染色體,即2n眾數(shù)是26Y染YHcNMHQ染色體。金清波等[41( 98/110x100% =89% )故該種蝙蝠的染色體數(shù)也曾對(duì)V. superans 的核型進(jìn)行了研究,報(bào)道其染色是2n=26。在12對(duì)常染色體中除No.5~No.7是體數(shù)目為2n=26 ,N.F =48常染色體中有10對(duì)中亞中部著絲粒染色體、No.11 ~ No. 12是微小點(diǎn)狀染部著絲粒染色體2對(duì)微小點(diǎn)狀染色體,X染色體為色體外,其余全部是中部著絲粒染色體,N. F =44亞中部著絲粒染色體。從染色體的組型看其報(bào)道貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)200634卷.的核型與本文及國(guó)外對(duì)東亞蝙蝠的核型研究結(jié)果迥守而第2、3種核型與其假設(shè)祖先相比2n數(shù)減少異9] ,而與我國(guó)已報(bào)道的伏翼屬的核型相似。但N.F值保持恒定故認(rèn)為這2種核型是由其假設(shè)Bickhamt 10]將蝙蝠科蝙蝠的核型劃分為3個(gè)類祖先2n=44,N.F=50的核型通過羅伯遜融合演化.型第1種類型保持核型上的原始特征,即染色體數(shù)而來第4種核型其2n數(shù)和N.F值均減少,其核目多端部著絲粒染色體多第2種類型具有較少的型進(jìn)化可能還伴有微小染色體的丟失是該屬中較染色體數(shù)目和較多的雙臂染色體;第3種類型的染為進(jìn)化的類群。不同地理分布的蝙蝠其進(jìn)化程度不.色體數(shù)目由于著絲點(diǎn)的融合而變得更少。本文研究同或不盡一致 來自塔吉克的P. P. bactrianus5 14]屬的東亞蝙蝠的核型則屬于第2種類型(表2 )。于第1種類群即較原始的類群，來自印度的茶褐伏表2東亞蝙蝠和東 亞伏翼的核型參數(shù)翼( P. affinis )141屬于第2類群;來自北美的東方伏Table 2 The karyotype parameter of V. superans and P. abramus翼( P. subflavus )I4則屬于第3類群。這些不同地東亞蝙蝠( V. superans )東亞伏翼(P. abramws)理區(qū)域之間同屬不同種間核型模式的差異,說明了編號(hào)相對(duì)長(zhǎng)度臂比類型相對(duì)長(zhǎng)度NumberRelativeAmmAm伏翼屬的祖先在長(zhǎng)期的進(jìn)化過程中,由于地理隔離,lengthratioType所受環(huán)境壓力的不同產(chǎn)生了分化形成了不同的種11.55 :0.19 1.08+0.08 m11.61士0.11 1.18 +0.0410.84土0.23 1.18 土0.05 m10.67土0.09 1.24 土0.06群。10.01土0.13 1.16 +0.09 m10.12+0.12 1.58 土0.049.65 +0.12 1.18 +0.069.53 +0.08 1.35 +0.05 1[參考文獻(xiàn)]9.39士0.13 1.14 +0.10 m9.10 +0.88 1.93土0.038.77 +0.12 1.13+0.06 m8.65 +0.111.93士0.03[1]馮江李振新,張喜臣.我國(guó)蝙蝠保護(hù)研究的現(xiàn)狀及對(duì)策2.59 +0.11 2.57 +0.16 sm8.16 +0.06 1.95 +0.05 sm[ J].東北師范大學(xué)學(xué)報(bào)2001( 2) 60-65.5.11 :0.157.59+0.15 1.26+0.04 m[ 2 ] Gareth Jones. 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F =44四種核型[12。第1233 243.種核型的種類,因具有與其假設(shè)祖先鼠耳蝠有相似(責(zé)任編輯:楊林)的核型,應(yīng) 是該屬中較原始的種類核型進(jìn)化相對(duì)保中國(guó)煤化工歡迎訂閱2007年《貴.MHCNMH G2007度征訂工作已開始,請(qǐng)廣大讀(作)者朋友速到當(dāng)?shù)剜]局訂閱本刊若錯(cuò)過郵局訂期亦可直接匯款到《貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)》編輯部訂閱。訂價(jià)8.00 元/冊(cè)全年48.00元。地址:貴陽市小河區(qū)貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院內(nèi)郵編550006電話0851 - 3760719 E-mail gznk@ 263. net。