不同濃度乙醇對大鼠肌肉組織影響的探討
- 期刊名字:中國美容醫(yī)學(xué)
- 文件大?。?43kb
- 論文作者:李岳令,陳石海,劉柳,段紅鈺
- 作者單位:廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院整形美容外科
- 更新時間:2020-06-12
- 下載次數(shù):次
國美容醫(yī)學(xué)2011年2月第20卷第2期 Chinese Journal of Aesthetic Medicine Feh201lvo.20N2程度的加重,這種變化漸趨明顯。因此,癥痕組織的形成 for image interpretation[]. Echocardiography200623(2):103-107.可能與機體細胞免疫功能異常升高和體液免疫功能水平[7冷向鋒王德昌然等燒傷后增生性癩痕成纖維細胞中TRAL降低有關(guān)。受體的表達及意義門中華整形外科雜志200521(6):444[參考文獻]gical Reviews, 2006, 20(9): 5-9[]閆貴春表銀輝痕發(fā)生機制研究進展門中國美容醫(yī)學(xué)2010,19[9)Cilio CM. Daws MR,Malashicheva A, et al. Cytotoxic T lymphocyte(8):1251-1253.antigen 4 is induced in the thymus upon in vivo activation and its[2]郭建輝,曹毅.癥痕治療的研究進展門浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,blockade prevents anti-CD3-mediated depletion of thymocytes [].J2007,31(3):402404Exper Med,1998188(7:1239-1246.[3]Borondo F, Wisniacki DA, Vergini EG, et al. The scar mechanism [10JImami N, Aspinall RGotch F. Role of the thymus in T lymphocyterevisited[]. Europ Physi J, 2008, 65(12): 93-101reconstitution(comment)]. Transplantation, 20006,(11)2238-2239[jAquet K, Krause KT, Denschel JR,et al. Eduction of myocardial sc[1姜五章季曉輝李五峰等環(huán)磷酰胺和環(huán)孢素A對SLE患者外size after implantation of mesenchymal stem cells in rats: what is the周血Th細胞亞群兔疫調(diào)節(jié)的作用團細胞與分子免疫學(xué)雜志mechanism[]? Stem Cells and Development, 2005, 14(3): 299-309.2008,24(2):172-174Drobnik J, Karbownik-Lewinska M, Szczepanowska Aet al.[2陳海燕韓捷華詠等類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者Th細胞亞群的檢測及礎(chǔ)研究Regulatory influence of melatonin on collagen accumulation in the其臨床意義門中國誤診學(xué)雜志20088(6:1272-1274infarcted heart scar J]. J Pine Res, 2008, 45(3): 285-290.[6JTabel GM, Whittaker P, Vlachonassios K,et al. Collagen fiber[收稿日期]201011-21[修回日期]201101-16morphology determines echogenicity of myocardial scar: implications編輯/張惠娟不同濃度乙醇對大鼠肌內(nèi)糾織影響的探討李岳令,陳石海,劉柳,段紅鈺(廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院整形美容外科廣西南寧530021)[摘要]目的:探討不同濃度乙醇對大鼠腓腸肌功能及組織學(xué)的影響.方法:選取等重的雄性SD大鼠75只,隨機分入A、B、C、DE五組,在各組大鼠左側(cè)腓腸肌注射D.2ml濃度分別為50、60%、70%、80%、9β%的乙醇,右側(cè)均注射相同量的生理鹽水,分別于注射后第3、7、14、21和28天分離大鼠左右側(cè)腓腸肌,檢測每只大鼠左右側(cè)腓腸肌的收編力差(△F)及肌體積差(△V),并取標本做巸?nèi)旧?光鏡下觀察肌肉組織學(xué)變化,結(jié)果:注射相同天數(shù),實驗組A、B、C、D組ΔF與△V隨乙醇濃度增加而明顯升高(R0.05),D組與E組之間無顯著差異(P0.05);同一乙醇濃度下,三周內(nèi),ΔF與ΔV均隨時間延長而明顯增加(R<0.05),與注射后第21天相比,注射后28天無明顯差異(P0.05)。光鏡下,隨著時間延長及濃度增大腓腸肌纖維化程度明顯加重.結(jié)論:隨著濃度(50%-80%)增加,乙醇對大鼠腓腸肌損傷程度加重;當乙醇濃度超過80%時,腓腸肌收縮功能基本喪失及組織學(xué)上基本纖維化。注射21天后,肌肉組織纖維化程度基本穩(wěn)定[關(guān)鍵詞]肌肉組織;乙醇;血菅瘤[中圖分類號]R732.2[文獻標識碼]A[文章編號]1008-64552011)02-0251-04To approach the different concentrations of alcohol on the myoideum of ratsLI Yue-ling, CHEN Shi-hai, LIU Liu, DUAN Hong-yu(Department of Plastic and Aesthetic Surgery The First Affiliated Hospital, Guangxi Medical University Nanning 530021Guangxi, China)Abstract: objective To explore the efficacy of the different concer中國煤化工of the functions andhistology of gastrocnemius muscle of rats. Methods 75 equipondeCN MH Gided into A.B. C DEfive groups randomly received the injection on the left of gastrocnemius muscle of rats in the 0.2ml of concentration ofalcohol that is 50%,60%,70%.80%.90% and on the right in the commensurate of physiological saline. Gastrocnemius通訊作者:陳石海,男,主任醫(yī)師,廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬氏院整形美容外科主任;主要研究方向:血管瘤皮瓣等E-mail: shihai003eyahoo com c中國美容醫(yī)學(xué)2011年2月第20卷第2期 Chinese Joumal of Aesthetie Medicine. Feb.2011Vol.20.No2muscle of rats was dissected 3, 7, 14, 21 and 28 days later, and detected the difference of contractility(AF)and organism(Av) Extracted the specimens in HE and observed the change of muscle tissue in light microscope. Results The groupsof d and E had no significant deviation (P>0.05)after the same of injection of days In the homo- concentration ofethanol, AF and Av increased obviously over time (P<0.05)in three weeks. Compared with 21 days later, 28 days laternad no significant deviation (P>0.05). With time and concentration obviously increased, the gastrocnemius increased thedegree of myofibrosis aggregately. Conclusion When the concentration of alcohol over 80%, the contractile function ofgastrocnemius muscle loss and organization of basic fibrosis. The degree of myofibrosis stabled basically 21 days later.Key words: muscle tissue; alcohol; hemangioma無水乙醇腫瘤內(nèi)灌注技術(shù)是近年來臨床上用于治療海1.5HE染色切片分析:測量體積后切取注射部位腓腸肌組綿狀血管瘤尤其是肌肉血管瘤( intramuscular織,10%甲醛固定,常規(guī)石蠟包埋切片,染色,光鏡下觀察肌hemangioma,IMD有效方法之一,但由無水乙醇對病變周圍細胞結(jié)構(gòu)、肌膜、肌纖維及細胞核的變化肌肉神經(jīng)等正常組織的損傷在一定程度上影響了疾病的治1.6統(tǒng)計方法:采用SPSs13.0統(tǒng)計分析系統(tǒng),所有數(shù)據(jù)結(jié)果療和病變部位功能的康復(fù)在某些情況下其危害性甚至超過均用均數(shù)士標準差(x士s)表示,用方差分析做組間比較及各了原發(fā)病。因此在無水乙醇治療腫瘤的過程中,了解尤水乙時間點間比較P0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義醇對正常組織的影響,從而降低無水乙醇對病變周圍正常組織的損傷,保證病變部位的功能是目前臨床亟待解決的問2實驗結(jié)果題。本研究旨在觀察大鼠腓腸肌對注射不同濃度乙醇的作用2.1實驗動物大體觀察結(jié)果注射乙醇后,大鼠后肢活動頻率效果探討不同濃度乙醇與骨骼肌之間的關(guān)系,為臨床應(yīng)用和幅度均有不同程度減少,以術(shù)后3~4日最為明顯,其中D提供選擇依據(jù)組E組后肢活動減少程度較A組、B組C組明顯。所有實驗動物未見明顯活動及覓食障礙。活體切取腓腸肌,與自身對照側(cè)1材料和方法相比,實驗側(cè)肌肉組織顏色蒼白、彈性降低,質(zhì)地變硬1.1實驗動物及分組:選取等重雄性SD大鼠75只,體重22腓腸肌收縮力△F:分別于注射不同濃度乙醇術(shù)后,第(180±10)g(廣西醫(yī)科大學(xué)動物實驗中心提供),隨機分入A、3、7、14、21、28天在活體狀態(tài)下手術(shù)分離出兩側(cè)腓腸肌,通過B、C、D、E五組,每組15只。在各組大鼠左側(cè)腓腸肌注射肌張力轉(zhuǎn)換器,測量其每側(cè)收縮力通過計算得出兩側(cè)變化0.2ml濃度分別為50%、60%、70%、80%、90%的乙醇,右側(cè)均注值。結(jié)果顯示:不同的處理組間P0.00,不同的乙醇濃度射相同量的生理鹽水。對腓腸肌收縮力△F的影響差異有統(tǒng)計學(xué)意義:D組與E組1.2動物模型的制備:實驗中首先腹腔內(nèi)注射1%戊巴比妥間P=0.993,80%與90%乙醇濃度對腓腸肌△F的變化差異無(40mg/kg);麻醉后,大鼠仰臥四肢外展位固定于解剖臺上,統(tǒng)計學(xué)意義不同的時間手術(shù)分離組間P0.00,說明時間對常規(guī)消毒鋪無菌巾單。于后肢小腿后側(cè)做縱形切口,分離、顯腓腸肌收縮力△F的影響差異有統(tǒng)計學(xué)意義:21天與28天露并游離腓腸肌。根據(jù)分組不同,各組分別于第3、7、14、21組間P0.933,第21天與28天手術(shù)對腓腸肌△F的變化差和28天隨機取1只大鼠做腓腸肌各種檢測異無統(tǒng)計學(xué)意義(表1)1.3腓腸肌收縮力變化△F的測定:預(yù)先運行 PCLab生物信實驗側(cè)/自身對照收縮力即為腓腸肌收縮力變化百分號采集處理系統(tǒng)將大鼠固定于實驗臺上。取后肢下段背側(cè)率,由各實驗組不同時間的腓腸肌收縮力改變可作出腓腸肌切口,切開皮膚分離出腓腸肌,于近端分離解剖出坐骨神經(jīng),收縮力變化趨勢見圖,見圖1遠端從肌腱止點處剪斷用絲線將其與肌張力換能器連接給通過觀察大鼠腓腸肌△F,了解肌肉收縮力的變化,可進予50g張力,使肌肉處于最適初長度。分別給予單收縮刺一步反映出腓腸肌功能的變化情況。隨乙醇濃度的增加AD激強直刺激,記錄收縮曲線和測量數(shù)值即得出腓腸肌收縮組實驗側(cè)肌肉收縮力減弱表明不同濃度(50%~80%)乙醇可力。通過測量每組大鼠兩側(cè)腓腸肌收縮力,求出每組平均差以導(dǎo)致肌肉收縮力變化不同隨著濃度升高收縮力降低,D值,即△F,觀察在第1天7天、14天、21天和28天各組腓組與E組之間△F沒有顯著差異,表明注射超過80%濃度乙腸肌平均收縮力ΔF變化情況醇腓腸肌基本纖維化;第21與第30天各組腓腸肌收縮力1.4肌肉體積變化△V的測定:顯露游離大鼠腓腸肌,在肌△F相比沒有顯著差異,表明注射乙醇21天后,腓腸肌組織肉起止點處切斷肌肉附著部,除去肌肉上附著的組織后將纖維腓腸肌放入已裝有6m1甲醛的10m1量筒內(nèi),觀察量筒刻度中國煤化工濃度乙醇術(shù)后,第3變化,即一側(cè)腓腸肌的體積.同樣測出另一側(cè)的體積,求出每7、14CNMHG鼠兩側(cè)胖腸肌待測組平均的差值,即ΔV。觀察在第3天、7天、14天、21天和量完收縮力后,迅速用量筒測量其體積,通過計算得出兩側(cè)28天各組腓腸肌平均體積△V變化情況腓腸肌體積變化△V。結(jié)果顯示:不同的處理組間P0.000中國美容醫(yī)學(xué)2011年2月第20卷第2期 Chinese joumal of aesthetic Medicine. Feb201 L. Vol.20N不同的乙醇濃度對腓腸肌體積△V的影響差異有統(tǒng)計學(xué)意由腓腸肌體積變化趨勢圖可見:在同一乙醇濃度下,隨義;D組與E組間P=0.96880%與90%乙醇濃度對腓腸肌體積著時間延長,腓腸肌體積逐漸縮小,第21天后,體積變化不△V的變化差異無統(tǒng)計學(xué)意義。不同的時間手術(shù)分離組間明顯。一周以后隨著注射乙醇濃度升高腓腸肌體積變化增P0.000說明時間對腓腸肌體積△V的影響差異有統(tǒng)計學(xué)大,乙醇濃度超過80%,腓腸肌體積變化不明顯。意義:21天與28天組間P=0.939,第2天與28天手術(shù)對腓2.4組織學(xué)觀察:腓腸肌組織H染色,光鏡下可見腸肌體積△V的變化差異無統(tǒng)計學(xué)意義(表2)。2.4.1空白組/自身對照側(cè):肌細胞顯紅色,肌細胞核位于實驗側(cè)/自身對照體積,即為腓腸肌體積變化百分率,細胞周邊肌膜下,顯藍褐色。常態(tài)下肌細胞排列整齊、大小規(guī)由各實驗組不同時間的腓腸肌體積改變可作出變化趨勢圖,則肌節(jié)完整可見(圖3)見圖2。2.4.2A組(50%乙醇):肌細胞排列整齊,肌纖維變細,肌膜整,肌間隙稍變寬,細胞核可見(圖4)?!鶤組2.4.3B組(60%乙醇):肌細胞排列、形態(tài)稍絮亂,肌纖維少許B斷裂、纖維化肌膜不完整肌間隙變寬細胞核可見(圖5)。C組b組244C組(7%乙醇):肌細胞排列絮亂,形態(tài)不規(guī)則肌纖維斷裂、纖維化明顯肌膜被破壞肌間隙較寬細胞核可見(圖6)礎(chǔ)研究2.4.5D組(80%乙醇):肌細胞結(jié)構(gòu)完全破壞,呈壞死狀態(tài),繼觀察時間(天)之壞死區(qū)纖維機化肌膜完全被破壞,細胞核碎裂消失(圖7圖1腓腸肌收縮力趨勢圖2.4.6E組(9鵑%乙醇):肌細胞結(jié)構(gòu)完全破壞,成纖維化,肌速:圖中ABC組與DE組相比在7-28天收縮力存在明顯差膜完全被破壞肌纖維斷裂、溶解,細胞核碎裂消失(圖8)。異DE兩組間差異無顯著性P0.053討論高濃度乙醇局部注射可以使受注射部位組織細胞脫水蛋白質(zhì)發(fā)生凝固性壞死,產(chǎn)生無菌性炎癥,進一步會發(fā)生纖維化和攣縮。自1983年日本杉浦倍之首先采用超聲引導(dǎo)下經(jīng)皮肝穿刺腫瘤內(nèi)注入無水酒精療法(PEI)治療肝癌以來。國內(nèi)外已逐步將無水乙醇應(yīng)用于臨床上,用于治療肝血管瘤觀察時間(天)肝囊腫國、腎囊腫、消化道出血以及海綿狀血管瘤等疾圖2腓腸肌體積變化趨勢圖病。由于灌注無水乙醇后,一些不可控因素常導(dǎo)致周圍正常注:圖中ABC組與DE組相比在7-28天體積變化存在明顯差異,DE兩組間差異無顯著性,P0.05組織的變性壞死,從而限制乙醇在臨床上的廣泛應(yīng)用。表1腓腸肌收縮力△F變化情況B組C組E組F值3天4.28±0.095.99±0.157.79±0.278.88士0.188.76±0.317天6.73±0.3515.54±0.5220.64±1.1640.26±0.5540.50±0.8014天27.28±0.3449.65±1.0964.83±29564.42±0.9915.690.00021天18.21±0.3732.73±2.155681±1.6475.55±0.6928天18.68±0.3532.28士1.405505士2.2773.99±14675.33士1,45F值衰2腓腸肌體積△V變化情況C組D組E組3天0.08±0.010.11±0.010.13±0.010.14±0.020.15士0.017天0.11±0.010.18士0.020.26±0.010.32±0.020.37±0.040.27±0.0.45±0.0321天0.16±0.00.40士0.030.60±0.62中國煤化工28天0.40±0.010.59±0.02CNMHGF值中國美容醫(yī)學(xué)2011年2月第20卷第2期 Chinese Joumal of Aesthetic Medicine. Feb20LVo20N2圖3正常大鼠肌肉圖4A組大鼠肌肉田5B組大鼠肌肉圖6c組大鼠肌肉圖7D組大鼠肌肉圖8E組大鼠肌肉肉內(nèi)血管瘤(MD是位于肌內(nèi)呈彌漫性生長的血管瘤,的進行研究比較少見,約占海綿狀血管瘤的08%,常見于四肢,其次為面部及軀干,多同時侵犯皮下,肌肉組織,甚全侵犯至骨[參考文獻]膜。目前醉灌注是治療IM的主要手段之一。IH一般位[樊雪強劉鵬肌肉內(nèi)血管瘤的診斷與治療門中日友好醫(yī)院學(xué)報,置比較深,血管畸形也比較嚴重,不但危及患者身體健康,治2005,19(4)242-24療上也有很大的風(fēng)險,尤其在乙醇注射的劑量較難把握劑量[2]Veriasova NN, Polysalov VN, Tarazov PG Long-term results of local小時效果不明顯劑量過大對周圍正常組織損傷嚴重導(dǎo)致器ethanol injection therapy in the treatment of hemangiomatosis of the官功能障礙極易出現(xiàn)嚴重并發(fā)癥。臨床有必要探索出既能治liver[].Veatm Khir Im ll Grek, 2003, 162(3): 22-26愈血管瘤,又不增加并發(fā)癥的乙醇治療濃度3]宓兵CT引導(dǎo)下穿刺注射酒精治療肝腎囊腫療效分析[中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新2010,18()133-134.本實驗將不同濃度醇注入大鼠肌肉組織來觀察肌肉[4]王瑾瑜張毅修有成B超引導(dǎo)下腎囊腫穿刺注射無水乙醇治療體積變化和肌肉收縮力改變同時組織切片觀察肌肉組織學(xué)12例報告門中華臨床醫(yī)學(xué)研究雜志20084(6):871改變情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn)乙醇濃度在50%-80%時,隨著注射乙醇5賀軍何龍泉陳曉理等無水乙醇介入治療消化道出血一例中濃度增加,大鼠骨骼肌體積縮小和肌力減弱的程度均呈正增華普通外科雜志2006,21(1)34.加在光鏡下肌肉組織破壞逐漸加重(見圖、ⅢⅦ);當乙[6楊琴李大鐵皮膚血管瘤治療方法的現(xiàn)狀及研究進展門遵義醫(yī)醇濃度超過80%時,大鼠骨骼肌體積縮小和肌力減弱的程度學(xué)院學(xué)報200629(1):85-88不明顯(P0.05),光鏡下見肌肉組織基本纖維化(見圖V、口7 Wild AT Raab P, Krauspe R Hemangioma of skeletal muscle[].ArchⅥ)。說明乙醇濃度<80%時,隨L醇濃度增加對肌肉組織破壞Orthop Trauma Surg, 2000, 120(3-4): 139-143程度加重;當乙醇濃度>80%時,肌肉組織基本完全被纖維化毛雅君許光旭等Ⅲ研究報告也與實驗的結(jié)果類同haemangioma report of twoith unusual localization U].Eur通過本實驗得知當注射乙醇濃度達到80%時,大鼠腓腸Arch Otorhinolaryngol, 2003, 260(9): 495-498肌組織纖維化已達到最大值再增加乙醇的濃度,只會增加高鳳山繼英杜軍無水醇栓塞及平陽霉素注射治療復(fù)發(fā)性海容雜志2004106)330332對周圍正常組織的損傷,而腓腸肌纖維化程度不在改變。通[10陳向齊傅琴香體表血管瘤治療進展福州總醫(yī)院學(xué)報2004過乙醇與肌肉關(guān)系的這一聯(lián)系,為臨床利用無水乙醇治療l()606IMH提供一個參考。[毛雅君許光旭楊曉顏等神經(jīng)干乙醇阻滯治療骨骼肌痙李的報注射低濃度L醇可使肌肉保有一定的功能在一定的程告中國康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志200621(8:716-717度上還使肌肉體秋變小,后期肌肉體積不易恢復(fù)等特點,可[2Dailure of botulinum toxin為臨床上治療良性咬肌肥厚常存在作用不持久等缺點四2提供一定參考YH中國煤化工上 Eur Neurol2.00452(3)CNMHG本實驗初步觀察了不同濃度乙醇對大鼠骨骼肌功能定的影響。如果要進行更為全面的觀察,尚須進一步研究骨[收稿日期]20101009[修糾日期20101223骼肌的形態(tài)、超微結(jié)構(gòu)生化指標的變化,同時還需更加深入編輯/張惠娟
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