葛花對(duì)酒后血中乙醇濃度和肝中乙醇脫氫酶活性的影響李萍1鐘贛生21.艾美仕市場(chǎng)調(diào)研咨詢(上海)有限公司北京分公司,北京100202.北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,北京100029擴(kuò)為了探討葛花對(duì)急性酒精中毒的防治作用,將雄性小鼠隨機(jī)分為空自組、模型組、葛花提取物組。給藥30min后,模型組與葛花組灌酒0.10mL/10g,在灌酒后05,1,15,2,25,3h分別摘眼球取血和取肝組織。采用生化酶法測(cè)定小鼠酒后不同時(shí)間內(nèi)血中乙醇濃度和肝中乙醇脫氫酶(ADH)活性。結(jié)果顯示,小鼠血中乙醇濃度在酒后05-2h達(dá)到高峰,與模型組相比,葛花提取物組0.5-3h內(nèi)的血中乙醇濃度數(shù)值降低。葛花提取物組對(duì)小鼠酒后05-1h肝中ADH的影響較為明顯,使其活性增加;酒后153h肝中ADH活性雖然也增強(qiáng),但與模型組比較無(wú)顯著差異。結(jié)果顯示,葛花提取物可降低酒后血中乙醇濃度,增強(qiáng)肝中ADH活性,其機(jī)制可能是通過(guò)抑制消化道對(duì)乙醇的吸收,從而起到有效的降醇解酒作用。關(guān)鬢司藟花;酒精中毒;解酒;乙醵濃度;乙醇脫氳酶活性中圖分類號(hào)R285.5文章端號(hào)10007857(2009)23-082Effects of Pueraria lobata(willd.The alcohol concentration in blood took the highest value in 0.5-1.5hours. Compared to the model group, the alcohol concentration inOhwi on Alcohol Content in Bloodblood for the group of aqueous extract of Pueraria lobata ( Willd.and Activity of AlcoholOhwi is decreased in 0.5-3 hours; the activity of Adh in the liver isDehydrogenase(ADh) of Animalsincreased in 2-3 hours (P>0.05), while it is significantly increasedin the first 0.5-1 hours (P<0.05). The aqueous extract of PuerariaAfter Drinking Alcohollobata willd. )Ohwi could reduce the alcohol concentration in bloodLI Ping, ZHONG Gansheng?of animals after being fed with alcohol and increase the activity ofADH. It relieves alcoh1. IMS Marketing Research Consulting(shanghai )Co. Lid.promoting the metabolism of alcohol in the liverBeying Branch, Beijing 100020, ChinaKeywords pueraria lobata (Willd. )Ohwion;2. College of Preclinical Medicine, Beiing University ofalcohol; alcohol concentration; activity of alcohol dehydrogenaseChinese Medicine, Beiing 100029, ChinaAbstract To observe the effect of Pueraria lobata(willd. )Ohwi on0引言relief of alcohol toxicity by animal experiments, female NIH mice中藥葛花是一味傳統(tǒng)的以解酒為主要功效的解酒專藥。were ovariectomized and randomly divided into 55 groups. The其味甘性涼自《名醫(yī)別錄》記載其具“消酒功效以后歷代本animal models of acute alcoholism were duplicated by force-feeding草方書多以此為解酒之專藥而極少用于其他疾病的治療。金them with liquor" er guo tou',. The influence of aqueous extract of元醫(yī)家李杲在其名著《脾胃論》中載“葛花解醒湯”,因療效卓Pueraria lobata ( Willd) Ohwion on the alcohol concentration in越,至今仍作為解酒的代表方,為臨床治療醉酒、酒病所常用blood within05-3 hours was studied by methods of biochemistry而《滇南本草》將葛花專列一條,謂其“解酒醒脾,酒毒酒痢,飲V凵中國(guó)煤化工收稿日期:200909-25CNMHG作者簡(jiǎn)介:李萍,研究方向?yàn)楦鸹ń饩频膶?shí)驗(yàn)學(xué)研究電于信箱:liping1031@wohu.com;鐘贛生(通信作者),教授,研究方向?yàn)樽砭脐粚?duì)急性酒精中毒的藥效學(xué)研究,電子信箱:zhonggansheng@sohu.com82科技導(dǎo)報(bào)200927(23)食不思,胸膈飽脹發(fā)呃,嘔吐酸痰,酒毒傷胃,吐血嘔血。消熱,解酒毒。"從古至今,以葛花為主藥的解酒方多不勝數(shù)葛衰1乙醇標(biāo)準(zhǔn)曲線Table 1 Alcohol concentration standard curve花不僅可以治療飲酒過(guò)量的醉酒急癥,對(duì)于酒毒蓄積體內(nèi),損傷血脈引起的吐血、嘔血等酒病重證亦可治療。乙醇濃度/(mg·dL)吸光度有文獻(xiàn)報(bào)道葛花對(duì)小鼠急性酒精中毒有治療作用,它能降低體內(nèi)乙醇濃度,降低乙醇毒性,并使乙醇過(guò)量造成的小鼠死亡率降至10%,還可大幅降低乙醉中毒小鼠血清ALT、AST0.172的活性改變小鼠因醉酒而引起的定向力降低,對(duì)急性酒精中0.266毒所致小鼠肝損傷有預(yù)防作用,并能顯著提高小鼠肝臟乙醇03540.512脫氫酶的活性。而本研究采用動(dòng)態(tài)連續(xù)觀察的方法,進(jìn)一步研究葛花對(duì)乙醇在體內(nèi)吸收和分解過(guò)程的影響,探討葛花解酒的藥效及作用機(jī)制,便于對(duì)葛花的進(jìn)一步開發(fā)利用,以及為中醫(yī)藥治療急性酒精中毒提供可信依據(jù)。1材料與方法1.1動(dòng)物NIH雄性小鼠體重18-22g,由衛(wèi)生部生物制品研究所動(dòng)物室提供。12藥材制備01020.3040506葛花,購(gòu)自北京布東四同仁堂參茸藥店,產(chǎn)地為河南省,吸光度經(jīng)北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院中藥教研室鑒定,為豆科植物野葛( Pueraria Lobata(Wld)ohwi)的花。圖1乙醇標(biāo)準(zhǔn)曲線藥材葛花以10倍量60%乙醇浸泡12h,回流提取2次,Fig. 1 Alcohol concentration standard curve第一次為2h第二次為1h。回流完畢,過(guò)濾,收醇濃縮真子生理鹽水模型組給予等量生理鹽水葛花高、中、低劑量組空干燥,研細(xì)過(guò)4目第置于陰涼干燥處保存。使用時(shí)葛按01m0g分別給予不同濃度葛花提取物,30m后花提取物加蒸餾水配制成所需濃度的溶液使用。其中,高、模型組與葛花組分別灌酒010ml·10g。6大組小鼠分別在中低劑量制劑含生藥分別為0804和02gmn,相當(dāng)于成灌酒后o5,1,15,2,25和3h摘眼球取血(肝素鈉抗凝)。在人用量的20,10和5倍。取血同時(shí)另取左肝葉邊緣肝臟組織備用,大小為2mmx13實(shí)驗(yàn)方法2mmX2mm(空白對(duì)照組小鼠只摘取肝臟組織備用)。從每管131對(duì)急性酒精中毒小鼠血中乙醇濃度的影響抗凝血中取出025mL,加生理鹽水075mL,以后各步驟同13.1.1制作乙醇標(biāo)準(zhǔn)曲線制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的步驟2)~3)。根據(jù)吸光度值,用標(biāo)準(zhǔn)曲線求出1)小鼠摘眼球取血放入用肝素鈉抗凝的試管內(nèi)。從每各樣品的乙醇含量(mg)管中取出025mL配成乙醇含量分別為250,5005,10013對(duì)急性酒精中毒小鼠肝中乙醇脫氫酶活性的影響和1500mg/L的溶液。用生理鹽水沖洗上述實(shí)驗(yàn)取出的肝臟,濾紙吸凈后稱重,2)上述每管各加34%高氯酸4mL,混勻,于300ovmn在冰浴中用玻璃勻漿器制備勻漿,300dmin低溫離心5離心5min,上清液作為標(biāo)準(zhǔn)液。min,上清液備檢測(cè)。在1cm比色杯內(nèi)加00021mo/LNAD3)取6個(gè)試管,分別加人乙醇脫氫酶(ADH)氧化型煙28mL,空白管加蒸餾水02ml,樣品管加03mL乙醇和酰胺腺嘌吟二核苷酸(NAD)液4m;繼續(xù)往其中一個(gè)加蒸上清液各01mL,混勻后于340m測(cè)上述各管吸光度觀測(cè)餾水01m,作為對(duì)照其余5個(gè)各加01mL.標(biāo)準(zhǔn)液室溫放其5m內(nèi)變化率△Amim置60min。用752-C紫外-可見分光光度計(jì)(上海第三分析儀ADH活性計(jì)算網(wǎng)器廠)于340mm測(cè)上述各管吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(見表1ADH活性(Ug")肝組織=和圖1)。肝重(g)x10y回歸方程為C=11792A-10.644;-09978a·l01肝勻漿體積(mL)1.3.12樣品測(cè)試式中中國(guó)煤化工02×10,l為比色杯小鼠300只,隨機(jī)分為6組(按時(shí)間段動(dòng)態(tài)觀察組),每組厚度Q50只再均分為空白組模型組葛花高、中低劑量組。實(shí)驗(yàn)13aLACNMHG前12h禁食不禁水。實(shí)驗(yàn)時(shí),空白對(duì)照組按0.20mL·10g給數(shù)據(jù)用x表示應(yīng)用SPs110統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析?？萍紝?dǎo)報(bào)200927(23)832結(jié)果21對(duì)急性酒精中毒小鼠血中乙醇濃度的影響暑028mL葛花組與模型組相比,酒后05h,低劑量組無(wú)顯著性差異(P0.05);中、高劑量組降低,有顯著性差異(P005,P001)酒后1h,低劑量組無(wú)顯著性差異(P005);中高劑量組均降低,有顯著性差異(P<005,P<001)。酒后1.5h,低、中、高劑量組均降低,有顯著性差異(P<0.05,P