第27卷第6期ood& MACHINErYvo.27,No.62011年11月Nov,201110.3969 j. issn.1003-5788.2011.06.025莓茶乙醇提取物的急性毒性研究Study on acute toxicological evaluation of ethanol extracts from fusty tea譚平1姚茂君2辛益妹3馬美湖2TAN Ping YAO Mao-jun2 XIN Yi-mei MA Mei-hu2(1.湖南機(jī)電職業(yè)技術(shù)學(xué)院湖南長沙410151;2,華中農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院湖北武漢430070;3中國人民解放軍空軍航空醫(yī)學(xué)研究所,北京100036)(1. Hunan Mechanical and Technical Polytechnic, Changsha, Hunan 410151, China;2. College of Food Science and Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan, Hubei 430070, China3. Institute of Aviation Medicine, Chinese PLA Air Force, Beijing 100036, China)摘要:對茶乙醇提取物的急性泰性進(jìn)行研究。取 Wistar莓茶是一種野生木質(zhì)藤本植物,又名甘露茶、藤茶、白大鼠40只,清潔鹹,隨機(jī)分為2組,每組20只,雌雄各半,以茶、龍須茶等,學(xué)名顯齒蛇葡萄( Am pelopsis最大耐受量法灌胃給予受試樣品組大鼠最大使用濃度和最grossedentata),主要分布于湖南湖北、貴州、云南、江西、廣大灌胃客量的葺茶乙醇提取物,1天2次(相隔4h),連續(xù)觀東福建等省區(qū)口。莓茶性涼味甘淡,具有清熱解毒降暑察14d。結(jié)果表明,受試樣品組大鼠毛色,皮膚,粘膜,眼晴,呼吸,循環(huán),自主活動及中樞神經(jīng)系統(tǒng)、行為表現(xiàn)等均與陰性生津消炎利尿、抗氧化、鎮(zhèn)痛等功效,是一種具有獨(dú)特保健對照組大鼠無明顯差別,整個試驗(yàn)期內(nèi)無大鼠死亡,莓茶乙功效和飲用價值的野生天然類茶植物。霉茶在武陵山區(qū)有酵提取物大鼠口服灌胃的最大耐受量為10.0g/kg大鼠體廣泛的分布和悠久的飲用歷史,千百年來,人們將其幼嫩莖重;對所有試驗(yàn)大鼠進(jìn)行大體解剖,組織器官未見有顏色、體葉加工成保健茶,用于治療咽喉腫痛、感冒發(fā)熱、黃疸型肝積、質(zhì)地等改變,說明驀茶乙醇提取物的毒性很小,具有較好炎、濕疹、皮炎等癥[2,莓茶水提取物主要活性成分為黃酮的食用安全性。類化合物3,5,7,3′,4',5′-大羥基-2,3雙氫黃酮醇(二氫關(guān)鍵詞:幕茶;顯齒蛇葡萄;二氬楊梅素;急性毒性Abstract, The acute toxicological evaluation was studied of ethanol楊梅素, dihydromyricetin,DMY),具有抑菌、消炎、鎮(zhèn)痛、止extracts from fusty tea( Am pelopsis grossedentata). The rats were咳、祛痰、抗高血壓、保肝護(hù)肝及解酒、消脂降糖抗氧化和given the ethanol extracts from fusty tea with the maximum concen-增強(qiáng)免疫力等多種藥理活性10,目前對莓茶乙醇提取物ration and capacity by gastric perfusion. twice a day,for14day.的毒理研究未見報道,本試驗(yàn)對其急性毒性進(jìn)行了研究,以were no abnormal reactions during the observation period on skin,期為莓茶的研究和進(jìn)一步開發(fā)提供參考。mucosa, coat color,eyes, breath,. circulation. locomotor activity.1材料與方法central nervous system, behavior etc, in Wistar sample group, with-out rats,death, and the maximum tolerance was 10. 0g/kg by gas-1.1儀器與材料tric perfusion, There were no change in the tissues and organs on1.L.1主要儀器設(shè)備volume, color and texture, which showed the extracts were low toxic小型粉碎機(jī):LH08B,浙江新昌紅利數(shù)控制造廠and a恒溫水浴鍋:B220,上海亞榮生化儀器廠;Keywords: fusty tea: ampelopsis grossedentata: dihydromyricetin: a電子天平:EB340HW型,日本 Shimadzu公司;超聲波清洗器:8200J4型,日本 Yamato公司;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器:RE52A,上海亞榮生化儀器廠;薔金項(xiàng)目:國家星火計劃項(xiàng)目(編號:2006EA770049)湖南省自然科上皿式電子天平:TMP2型,湘儀天平儀器設(shè)備有限學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號:06J15019);湖南省教育廳高?？乒?研項(xiàng)目(編號:11c0475)噴霧干燥機(jī):GB22,日本 Yamato公司。作者簡介:譚平(1968-),男湖南機(jī)電職業(yè)技術(shù)學(xué)院副教授,碩士E-mail:tan_xiting@126.com1.1.2材料收稿日期:2011-08-01清潔級 Wistar大鼠:40只,由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動物提取與活性2011年第6期科學(xué)部提供(合格證號為 SCXKL[京]20020001,動物使用14天受試樣品組雄性大鼠平均體重為(194.16±7.86)g許可證為SYXK[軍]2002010),雌雄各半體重160~180g14d內(nèi)受試樣品組雄性大鼠體重增加了20.11g試驗(yàn)大鼠飼養(yǎng)條件:相對濕度50%(士5%),溫度22℃受試樣品組雕、雄大鼠體重與陰性對照組無明顯差別,(±2℃),光照12h明、12h暗,全屏障清潔級動物實(shí)驗(yàn)室14d內(nèi)動物生長情況良好,表明莓茶乙醇提取物對大鼠體重內(nèi);喂飼全價營養(yǎng)顆粒飼料(北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動物科學(xué)無明顯影響。結(jié)果見表1。部提供),紫外滅菌后自由攝食;飲水為城市自來水,過濾后表1書茶乙醇提取物對動物體重的影響(x士s裝人消毒過的飲水瓶內(nèi),自由飲用Table 1 Effects of ethanol extracts from fusty莓茶(按綠茶加工工藝制成):湖南省保靖縣秦簡茶科技tea to the body weight of mouse開發(fā)有限公司。體重/g生理鹽水注射液(規(guī)格:500mL/瓶,批號:060509112),組別北京雙鶴藥業(yè)股份有限公司。7 d14d桶裝飲用純凈水:購于北京華玉時尚飲料有限公司。受試早10172.48±5.35181.7±6.06190.64±6.23無水乙醇:化學(xué)純,北京化學(xué)試劑公司樣品組♂10174.05±5.90184.90±4.76194.16±7.861.2莓茶乙醇提取物的制備陰性♀10173.95±4.48182.62±5.53191.09±5.43將莓茶粉碎、過篩,稱取一定質(zhì)量的莓茶粉,按料液比為對照組♂10173.95±5.31184.99±5.51194.98±7.951:18(mtV)加入65%的乙醇溶液,在60℃下,超聲波提取40min抽濾;濾液采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進(jìn)行濃縮,待料液可溶性2.3對受試樣品組一般體征的影響固形物含量達(dá)到30%左右即可;經(jīng)噴霧干燥得莓茶乙醇提取受試樣品組大鼠灌胃給予莓茶乙醇提取物(劑量為物,依文獻(xiàn)[4]測其二氫楊梅素含量約為70%。10.0g/kg大鼠體重)后,連續(xù)觀察14d,所有受試大鼠的毛1.3急性毒理學(xué)試驗(yàn)發(fā)光澤度、大小便攝食活動狀態(tài)和自主活動等均未見異常根據(jù)文獻(xiàn)[11~13],將試驗(yàn)用大鼠隨機(jī)分為受試樣品組改變和陰性對照組,每組20只,雌雄各半,陰性對照組給予生理4對受試樣品組主要臟器的影響鹽水注射液,受試樣品組給予莓茶乙醇提取物。給予受試樣對所有受試大鼠進(jìn)行大體解剖,未見其組織器官出現(xiàn)顏品途徑:大鼠口服灌胃。給予莓茶乙醇提取物或生理鹽水注色體積和質(zhì)地等改變。受試樣品組大鼠皮膚粘膜、眼睛、射液后實(shí)驗(yàn)室觀察14d,每日記錄大鼠的自主活動外觀癥呼吸循環(huán)及中樞神經(jīng)系統(tǒng)、行為表現(xiàn)等反應(yīng)與陰性對照組狀大鼠的死亡數(shù)及死亡時間,對死亡鼠進(jìn)行尸體解剖觀察大鼠無明顯差別主要臟器和組織有無肉眼可見的病理學(xué)變化3結(jié)論2結(jié)果與分析以受試樣品最大使用濃度、受試動物最大灌胃容量,給因受試莓茶乙醇提取物樣品溶解度限制,試驗(yàn)中以予 Wistar大鼠口服灌胃莓茶乙醇提取物劑量為10.0g/kg0.25g/mL比例將受試樣品配制成水混懸液,給予受試樣品大鼠體重,在觀察期內(nèi)受試樣品組大鼠毛色,皮膚,粘膜,眼劑量為20.0mL/kg(大鼠體重),1d2次(相隔4h),1d累睛,呼吸循環(huán)自主活動及中樞神經(jīng)系統(tǒng)行為表現(xiàn)等均與計劑量為10.0g/kg(大鼠體重),陰性對照組給予生理鹽陰性對照組大鼠無明顯差別整個試驗(yàn)期內(nèi)無大鼠死亡發(fā)水注射液20.0mL/kg(大鼠體重),1d2次。生,莓茶乙醇提取物大鼠口服灌胃的最大耐受量為2.1受試樣品組死亡情況10.0g/kg(大鼠體重);對所有試驗(yàn)大鼠進(jìn)行大體解剖,組織受試樣品組大鼠口服灌胃給予受試樣品莓茶乙醇提取器官未見有顏色、體積、質(zhì)地等改變。本試驗(yàn)結(jié)果表明莓茶物,劑量為10.0g/kg大鼠體重;整個試驗(yàn)期14d內(nèi)無動物乙醇提取物急性毒性很小,具有較好的食用安全性,臨床應(yīng)死亡發(fā)生,受試樣品組20只大鼠全部存活。用安全可靠,具有進(jìn)一步研究開發(fā)價值,為莓茶的后續(xù)研究2.2對受試樣品組體量的影響提供了試驗(yàn)依據(jù)但急性毒性實(shí)驗(yàn)僅數(shù)次給藥,觀察時間較第1天受試樣品組雌性大鼠平均體重為(17248士短,故還應(yīng)結(jié)合長期毒性試驗(yàn)的毒性表現(xiàn)及多種檢查結(jié)果綜35)g,第7天受試樣品組雌性大飄平均體重為(181.77士合分析評價其毒性。6.06)g,7d內(nèi)受試樣品組雌性大鼠體重增加了9.29g,第14天受試樣品組雌性大鼠平均體重為(190.64士6.23)g,參考文獻(xiàn)14d內(nèi)受試樣品組雌性大鼠體重增加了18.16g1中國科學(xué)院植物研究所中國高等植物圖鑒補(bǔ)編(第2冊)[M第1天受試樣品組雄性大鼠平均體重為(174.05±北京:科學(xué)出版社,1983:349~3565.90)g,第7天受試樣品組雄性大鼠平均體重為(184.90士2王文采.葡萄科新發(fā)現(xiàn)[J].植物分類學(xué)報,1979,17(3):110~4.76)g,7d內(nèi)受試樣品組雄性大鼠體重增加了10.85g第(下轉(zhuǎn)第106頁)提取與活性2011年第6期衰2正交試驗(yàn)結(jié)果溶劑微波功率300W,提取時間120s,料液比1:35Table 2 Results and analysis of orthogonal test(m:V)。該條件下,石榴皮多酚提取率可達(dá)21.41%。表實(shí)驗(yàn)序號AD多酚提取率P/%明微波輔助工藝有利于石榴皮多酚的提取,所建立的工藝可獲得較高的多酚提取率,具有良好的應(yīng)用前景。19.37參考文獻(xiàn)21.661宋立江狄寶石碧植物多酚研究與利用的意義及發(fā)展趨勢[J]化學(xué)進(jìn)展,2000,12(2):161~1702 Nevin K G, Rajamohan T. 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