經(jīng)驗交流中國釀造2009年第8期總第209期:115乙醇生物傳感器及其在線檢測技術(shù)的應(yīng)用黃從軍,許超群,洪厚勝,張慶文(南京工業(yè)大學(xué)材料化學(xué)工程國家重點實驗室,江蘇南京210009)要:乙醇生產(chǎn)過程中乙醇濃度的在線檢測對乙醇的質(zhì)量與安全控制具有重大的意義。本文對乙醇生物傳感器、乙醇在線檢測技術(shù)及其在發(fā)酵工業(yè)檢測中的應(yīng)用進行了研究分析與展望關(guān)鍵詞:乙醇;生物傳感器;乙醇檢測;在線檢測技術(shù)中圖分類號:TQ515.8文獻標(biāo)識碼:B文章編號:0254-5071(2009)08-0115-03Ethanol biosensor and its application of online detection techniqueHUANG Congjun, XU Chaoqun, HONG Housheng, ZHANG QingwenAbstract: It was of great significance to solve the online detection of ethanol concentration in the production process for controlling the quality andsafety. This review focused on the introduction and the prospect of ethanol biosensors, the ethanol online measuring technique and its application inethanol fermentation industrial detection.Key words: ethanol; biosensor; ethanol detection; online detection technique乙醇是基礎(chǔ)的工業(yè)原料,主要用于食品、化工、軍工、 neum)與氧電極偶合制成乙醇傳感器,一個月后其活性醫(yī)藥等領(lǐng)域。燃料乙醇為“十五”示范工程重大項目,我下降25%。李永生等基于ADH和煙酰胺腺嘌呤二核苷國將大力發(fā)展燃料乙醇。乙醇含量的測定也是乙醇飲料酸(NADH)氧化還原體系開發(fā)了一種乙醇毛細(xì)生物傳感器與相關(guān)發(fā)酵產(chǎn)品質(zhì)量控制的關(guān)鍵之一。傳統(tǒng)的檢測乙醇(ECB)。其線性范圍為20gL~15gL,檢出限為L.11g的方法(如比重瓶法、氧化法、氣相色譜法、折光法、近紅L。ECB重現(xiàn)性好、操作簡便樣品用量少,測定成本低;可外光譜法、分光光度分析法()、熱值分析法、催化動力實現(xiàn)乙醇的微量化、快速化測定。 AKYILMAZ E等開發(fā)學(xué)光度法、模塊化的拉曼光譜、高性能高效液相色譜出一個基于過氧化氫酶的生物傳感器用于測定啤酒中的乙法、分光酶法、沸點下降法以及毛細(xì)管電泳等),需要較醇;吡咯喹啉醌脫氫酶°已用于葡萄酒的測定好的操作技能或昂貴的儀器設(shè)備。傳統(tǒng)乙醇離線檢測任1.2微生物電極法務(wù)重、費時、易污染、滯后且不易實現(xiàn)自動化控制微生物電極法是近年來發(fā)展起來的新檢測技術(shù),測定乙醇濃度是發(fā)酵過程中重要的過程參數(shù)直接影響著醇類的微生物電極已有報道。王曉輝等用乙醇微生物發(fā)酵過程的控制優(yōu)化及發(fā)酵產(chǎn)物的質(zhì)量、產(chǎn)量。為了對電極建立了一種測定啤酒中乙醇含量的新方法。由土壤發(fā)酵過程進行有效地優(yōu)化控制,迫切需要對乙醇濃度參數(shù)中分離篩選出一株同化乙醇性能良好的好氧菌經(jīng)處理得進行在線實時檢測。新型生物傳感器的研制也成了乙醇到濕菌體。用PVA溶液、纖維素等材料將其包埋,制成固在線檢測的關(guān)鍵技術(shù)之一。因此,研究微生物發(fā)酵過程中定化微生物膜。將膜切成適合電極裝配的形狀,覆蓋在氧乙醇濃度在線檢測技術(shù),研制智能化、測量精度高、操作簡電極的塑料膜上,制成乙醇微生物電極。乙醇微生物電極便的乙醇濃度在線檢測儀具有實行質(zhì)量跟蹤、提高產(chǎn)品質(zhì)用其測定啤酒酒精度,簡單、快速、準(zhǔn)確、價廉并可現(xiàn)場跟量、降低生產(chǎn)成本及減輕勞動強度等實際應(yīng)用價值。蹤監(jiān)測,是一種有價值的方法。如何解決其選擇性差,壽1乙醇生物傳感器技術(shù)命短的問題有待于進一步研究。1.1微生物酶1.3生物與高分子材料結(jié)合法常見的制備乙醇生物傳感器所用生物活性材料有乙乙醇生物傳感器利用生物與材料相結(jié)合的制造方法,醇脫氫酶、乙醇氧化酶和微生物細(xì)胞。但乙醇脫氡酶要求具有檢測直觀速度快、靈敏度高的特點。管玉國等采介體煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD')存在,導(dǎo)致電極制備用 PECVD方法,分別淀積了SnO2-Fe2O3SnO2-TO2-難度大和分析費用高;微生物細(xì)胞傳感器響應(yīng)時間較長、Fe203吡艸料,制成了旁熱式傳感穩(wěn)定性不好。如早期研制的絲孢酵母菌( Trichosporon Cut-器。的元件對乙醇有很高的CNMHG收稿日期:2008-04-09基金項目國家重點基礎(chǔ)研究計劃937計劃(2007cB714305)作者簡介:黃從軍(1982),男,江蘇鹽城人,碩土研究生,主要從事酒精發(fā)酵設(shè)備的研究工作。2009No.8116· Serial No.209China BrewingExperience Exchanges靈敏度與選擇性。李莎等回以明膠包埋法作為乙醇氧化生物傳感器是利用微生物、酶等活性物質(zhì)將待測物轉(zhuǎn)酶(AOX)的酶固定化方法,選擇加入增效最明顯的多壁化為能被已有的成熟傳感器所感知的物質(zhì)再進行檢測。納米碳管( MWCNTs)提高靈敏度。制備出一種高靈敏度般是由固定化酶或細(xì)胞和電化學(xué)或物理傳感器組成的抗干擾性電流型乙醇生物傳感器。該傳感器靈敏度高、穩(wěn)種能測定溶液中某種或某一類化學(xué)物質(zhì)的傳感器裝置。定性好、抗干擾能力強,為新材料引入為制備高性能乙醇生物乙醇傳感器具有簡便快速、精確等優(yōu)點對發(fā)酵過程生物傳感器提供思路與方法,對乙醇生物傳感器的研究、中乙醇濃度參數(shù)可進行在線實時檢測進行有效的優(yōu)化控開發(fā)及利用具有一定的參考價值。制,是乙醇在線檢測的重要研究方向之2乙醇在線檢測技術(shù)2.2乙醇生物傳感器在線檢測系統(tǒng)乙醇易揮發(fā)、燃燒,在酒精發(fā)酵生產(chǎn)中,對其含量實施乙醇在線控制系統(tǒng)不僅可以幫助實現(xiàn)發(fā)酵溫度的控快速檢測,是實現(xiàn)安全監(jiān)測和生產(chǎn)過程優(yōu)化控制的必要制,并且可以通過在控制面板預(yù)先設(shè)定乙醇含量來完成發(fā)前提。酵過程進料與出料的自動控制。虛擬檢測儀器技術(shù)與系2.1乙醇在線檢測技術(shù)原理與研究統(tǒng)辨識相結(jié)合,以微控制器為核心的嵌入式系統(tǒng)完成信號利用光學(xué)原理的乙醇濃度檢測技術(shù)包括光纖傳感器采集、數(shù)據(jù)分析與處理,建立乙醇濃度的在線測量模型及和液芯光波導(dǎo)傳感器等。光纖濃度傳感器是根據(jù)被測溶相應(yīng)算法,對研制乙醇濃度在線檢測儀有重要的指導(dǎo)意液折射率取決于其濃度和溫度的原理進行測量的。液芯義。胡長鵬等建立了基于氣液相平衡原理的液相乙醇光波導(dǎo)傳感器也是利用乙醇濃度與折射率的關(guān)系進行測濃度的軟測量計算模型。研制出一種P模式液相乙醇濃量。朱艷英將多圈光纖芯放入溶液中,根據(jù)溶液中的度在線檢測系統(tǒng),主要包括嵌入式系統(tǒng)的硬件結(jié)構(gòu)和整個折射率與反射光的關(guān)系,測出了溶液(如白酒)酒精度。系統(tǒng)的軟件構(gòu)成。該系統(tǒng)具有測量準(zhǔn)確度高、通用性好、其結(jié)構(gòu)簡單、可在線測量、穩(wěn)定性能較好、不受溶液波動的響應(yīng)速度快、性能穩(wěn)定等特點影響但缺點是測量精度不高,光芯受力易折斷。3乙醇生物傳感器在線檢測技術(shù)在工業(yè)中的應(yīng)用目前,基于聲學(xué)原理研制的超聲波乙醇濃度在線檢測乙醇傳感器已用于食品工業(yè)發(fā)酵工業(yè)、燃料乙醇、環(huán)儀的測量精度為±0.2%。利用超聲波在溶液中的傳播速境檢測海洋監(jiān)測、交通安全、藥物檢驗、生物醫(yī)學(xué)工程等度與濃度的相互關(guān)系,通過檢測超聲傳播時間及溫度,然許多領(lǐng)域中。乙醇生物傳感器作為乙醇傳感器的重要組后借助于計算機運算去推算濃度。選擇合適的材料與電成與發(fā)展方向,目前已應(yīng)用于在線或非在線的乙醇檢測。極可以有效地降低溫度對超聲波信號的影響,提高檢測的在工業(yè)化生產(chǎn)乙醇中要實現(xiàn)自動化過程控制應(yīng)借助于傳靈敏度。這種超聲波乙醇傳感器有效檢測濃度范圍較窄,感器進行在線連續(xù)檢測但其壽命長,無需定期更換部件,具有非接觸、實時、快速、3.1釀酒工業(yè)精確、易于控制等優(yōu)點。目前,在釀造酒精飲料中需要測定乙醇含量的有蒸餾離線檢測技術(shù)因其固有的缺陷使其不能滿足生產(chǎn)過酒、啤酒葡萄酒配制酒果酒米酒等。我國是生產(chǎn)飲用程自動化方面的要求;基于光學(xué)、聲學(xué)原理的檢測技術(shù)都酒的大國,在糧食短缺的今天,實現(xiàn)釀酒工業(yè)的過程乙醇不能很好地排除其他溶質(zhì)濃度變化引起的干擾,事實上其檢測與控制對于提高原料利用率、降低生產(chǎn)成本、提高酒他溶質(zhì)的濃度變化可能比乙醇濃度的變化更為劇烈,從而質(zhì)具有很高的應(yīng)用價值。如全自動啤酒分析儀( SCABA)嚴(yán)重干擾測量在啤酒工業(yè)已經(jīng)得到了廣泛的應(yīng)用,其精度較高,可在半導(dǎo)體氣敏傳感器是利用待測氣體與半導(dǎo)體(主要3min內(nèi)準(zhǔn)確地分析樣品中的重要參數(shù)指標(biāo)。是金屬氧化物)表面接觸時產(chǎn)生的電導(dǎo)率等物性變化來3.2燃料乙醇檢測氣體的。其優(yōu)點是響應(yīng)速度快、重復(fù)性好且不會影響能源短缺是21世紀(jì)面臨的重大問題之一。我國是個發(fā)酵過程。用于酵母流加發(fā)酵生產(chǎn)中乙醇濃度在線檢測石油短缺國家燃料乙醇是一種潛力巨大的可再生性生物的測量儀就是依據(jù)氣液相平衡原理進行測量但是由于沒能源加入一定比例的乙醇作燃料,具有節(jié)約石油、凈化空有采取濾除干擾氣體的措施在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的其他氣氣、轉(zhuǎn)化剩余生物資源等一舉多得之效。目前許多生物化體成分可能給檢測帶來較大的誤差。半導(dǎo)體氣敏傳感器工生中國煤化工隳運用計算機將乙醇另一個缺陷是普遍對溫濕度敏感。雖然開發(fā)新材料優(yōu)化生物CNMHG時保存及反饋,實現(xiàn)乙制作工藝等可以克服這一缺陷,但直到現(xiàn)在環(huán)境溫濕度仍醇濃度的在線檢測與控制,及時調(diào)整生產(chǎn)流程使生產(chǎn)達到是制約半導(dǎo)體氣敏傳感器測量精度的重要因素,因此在溫最佳狀態(tài),對提高燃料乙醇質(zhì)量、實行質(zhì)量跟蹤、降低生濕度變化大的應(yīng)用場合應(yīng)該考慮采取補償措施。成本等有重要意義。經(jīng)驗交流中國釀造209年第8期總第209期1173.3釀醋工業(yè)生物傳感器均不能經(jīng)受高溫滅菌使用壽命短且微生物電種無試劑型媒體電極專利產(chǎn)品,利用乙醇脫氫酶電極有易導(dǎo)致染菌而污染發(fā)酵過程。生物傳感器技術(shù)的不極和酵母乙醇電極的乙醇生物傳感器目前已經(jīng)研制成功,斷進步,必然要求不斷降低產(chǎn)品成本提高靈敏度、穩(wěn)定性在釀造行業(yè)及有關(guān)科研中得到應(yīng)用。本實驗室自主開發(fā)的和壽命。這些特性的改善也會加速生物傳感器市場化,商高效自吸式發(fā)酵罐是一種專利新產(chǎn)品,其中AAF系列自吸品化的進程,具有廣闊的應(yīng)用前景。式發(fā)酵罐以酒精發(fā)酵液為培養(yǎng)基進行醋酸分批發(fā)酵。其用4.4乙醇在線檢測技術(shù)的自動化、智能化、微型化、集成乙醇生物傳感器構(gòu)成醋酸發(fā)酵在線檢測控制系統(tǒng),采用觸化、實用化摸屏計算機作為控制上位機智能儀表為下位機,實現(xiàn)發(fā)酵未來的生物傳感器必定與計算機緊密結(jié)合,自動進行過程中酒精濃度實時在線檢測與控制。定時對發(fā)酵醪中乙數(shù)據(jù)采集與處理,更科學(xué)、準(zhǔn)確地提供結(jié)果,實現(xiàn)采樣、進醇?xì)埩康臏y定,以確定醋酸發(fā)酵最佳的結(jié)束期抑制醋酸菌樣、結(jié)果三位一體,形成檢測的自動化系統(tǒng)。生物芯片是過度氧化防止產(chǎn)品丟失。適用于液態(tài)醋、酵母、聚羥基丁生物傳感器的延伸與發(fā)展,能夠進行高通量的生物學(xué)信息酸(PHB)等產(chǎn)品的科研與生產(chǎn)。目前已經(jīng)用于科研機構(gòu)及轉(zhuǎn)換和獲取,實現(xiàn)檢測系統(tǒng)的集成化、一體化。同時乙醇企業(yè)的微生物研究室、中試車間和工業(yè)生產(chǎn)線。在線檢測系統(tǒng)向著體積微型化發(fā)展,越來越具有可操作性3.4食品工業(yè)和實用性。乙醇在線系統(tǒng)的自動化智能化對乙醇的質(zhì)量在與乙醇相關(guān)的食品安全檢測中直接使用乙醇生物傳控制、節(jié)約工作量提高工作效率有重要的意義。感器簡便快捷結(jié)果準(zhǔn)確,并且適用于現(xiàn)場在線檢測。天津乙醇生物傳感器已經(jīng)廣泛地應(yīng)用到乙醇工業(yè),并取得商業(yè)大學(xué)利用核微孔酶膜制造乙醇生物傳感器已經(jīng)獲得了較好的效果但仍需進一步研究。優(yōu)良的乙醇生物傳感了專利,該技術(shù)既可以快速檢測乙醇又可以用于乙醇類產(chǎn)品器應(yīng)該有敏感性準(zhǔn)確性、操作簡單使用壽命長、價格便的發(fā)酵控制、質(zhì)量控制等,無需很大的設(shè)備和廠房投資。宜、容易進行批量生產(chǎn)、有利于自動化監(jiān)測與控制等。可4研究方向及其展望以預(yù)見,乙醇生物傳感器及乙醇在線檢測技術(shù)將在現(xiàn)代乙4.I乙醇檢測新技術(shù)醇檢測與分析中發(fā)揮越來越大的作生物酶的固定化技術(shù)、物理吸附法、化學(xué)聚合、交聯(lián)參考文獻法、流動注射分析法等都在乙醇檢測中得到了創(chuàng)新與應(yīng)[1]陸道禮,林松陳斌.近紅外光譜法快速測定啤酒中乙醇的含用。如固定化酶熒光毛細(xì)管分析法(EBCR),優(yōu)于液囔[門]釀酒科技,2005,130(4):8789體酶的方法,可以反復(fù)使用節(jié)省大量昂貴的酶,已經(jīng)用于(2] PILONE G J. Determination of Ethanol in Wine by titrimetric and Spec-白酒中乙醇的測定。photometric Dichromate methods- collaborative study [J].J Assoc4.2新型乙醉傳感器的研制Ou Anal Cbem,1985,68(2):188-190.新型乙醇傳感器技術(shù)有多種方法涉及到物理、化學(xué)、[3]粟智車云霞高學(xué)平等,用熱值分析法測定飲用酒的酒精[電化學(xué)、材料光學(xué)、計算機以及生物等學(xué)科。乙醇熒光光中國酸造,2006(9):68-70.感器微器件與集成光學(xué)纖維微電導(dǎo)傳感器、石墨環(huán)氧樹/y{1.安徽師范大學(xué)學(xué)報.2002(2)~定啤酒中的乙原纖傳感器、光導(dǎo)型光纖傳感器()、鎳鉑合金電流乙醇傳41朱呂青,周宏標(biāo),李水新等,儷化動力學(xué)光度法測定啤酒中的乙摩脂復(fù)合電極均可用于乙醇的測定。壓電生物傳感器2[5] MENDES LS, OLIVEIRA FC C. Determination of ethanol in fuel ethanoland beverages by Fourer transform(FT)-near infrared and FT-Raman( Piezoelectric Biosensor)是一種將高靈敏的壓電傳感器與spectrometries[J]. Anal Chim Acta, 2003, 493(2): 219-231.特異的生物反應(yīng)結(jié)合在一起的新型生物分析方法。已成[6] VIDIGAL SMP,Tomv. RANGEL AO SS Sequential injectio為當(dāng)前生物傳感器領(lǐng)域中的一個研究熱點,對乙醇生物傳LoV format for peak height and kinetic measurement modes in the spec-感器的研制提供一種新的思路與方法。隨著生物傳感器trophotometric enzymatic determination of ethanol: Application to differ-技術(shù)的發(fā)展,乙醇生物傳感器的優(yōu)勢會得到更好的體現(xiàn),ent alcoholic beverages [J]. Talanta, 2008, 77(2): 494-499相應(yīng)更高效的乙醇檢測儀器也會隨之出現(xiàn)[7]李永生,高秀峰齊嬌娜,等.乙醇熒光毛細(xì)生物傳感器的研究[J]4.3乙醇生物傳感器準(zhǔn)確、快速、可靠、價格低、性能高釀酒科技,200,145(7):34-36生物傳感器的研究工作將主要圍繞選擇活性強、選擇中國煤化工減" 105cples [J]. Talanta, 2003, 61性高的生物傳感元件;提高信號檢測器與轉(zhuǎn)換器的使用壽CNMHG命;生物響應(yīng)的穩(wěn)定性和生物傳感器的微型化、便攜式等(9 NICULESCU M, MIELIAUSKIENE R, LAURINAVICIUS. Simult問題。生物傳感器專一、快速、準(zhǔn)確,具有特異的生物分子detection of ethanol, glucose and glycerol in wines using pyrroloquinoline識別功能和均勻快速的物理化學(xué)方法相結(jié)合的特點。但quinone-dependent dehydrogenases based biosensors [J]. Food Chem2009No.8118. Serial No 209China Brewing檸檬酸發(fā)酵液脫色工藝的研究高年發(fā),韓德新,劉欠欠(天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院,天津300457)摘要:介紹了粉末活性炭、顆?；钚蕴?01x7陽離子交換樹脂、顆?；钚蕴?01x7陽離子交換樹脂對檸檬酸發(fā)酵液的脫色效果以及損耗程度,確定了適合檸檬酸發(fā)酵液的脫色劑及脫色工藝。該工藝的研究不僅降低了檸檬酸的生產(chǎn)成本而且對整個有機酸以及氨基酸行業(yè)的脫色工序都有重要的實際意義。關(guān)鑣詞:檸檬酸;脫色;活性炭;顆粒活性炭;001×7陽離子交換樹脂;損耗中圖分類號:TQ28.3文獻標(biāo)識碼B文章編號:0254-5071(2009)08-00118-03Decolorization technology of citric acid fermentation brothGAO Nianfa, HAN Dexin, LIU00457, ChinaAbstract: The effects of powdered activated carbon, granular activated carbon, 001 x7 cation exchange resin and granular activated carbon-001 x7 cation exchange resin on the decolorization of citric acid fermentation broth and the loss of citric acid were discussed. The optimal decoloring agentand decolorizing technology for citric acid fermentation broth were determined. The research on decolorizing technology of citric acid fermentationbroth would not only decrease the production cost of citric acid, but also have considerably practical significance on the decolorizing treatment in organic acid and amino acid industrieKey words: citric acid; decolorization; activated carbon; granular activated carbon; 001 x7 cation檸檬酸發(fā)酵液是一種非常復(fù)雜的多元混合體系,色素也是檸檬酸行業(yè)目前還是用炭粉的原因之一。樹脂吸附是其中的一類。發(fā)酵液中的色素來源主要有3種:原料本+活性炭顆粒克服了粉末炭和顆粒炭的缺陷,是目前最流身帶有;由發(fā)酵過程中菌體代謝產(chǎn)生;由發(fā)酵液中某些成行、最有前景的脫色工藝。本實驗對上述3種脫色劑進行分相互反應(yīng)產(chǎn)生。色素的存在不僅影響產(chǎn)品的外觀,而且比較,確立了適合檸檬酸發(fā)酵液脫色的最好的脫色工藝關(guān)系到產(chǎn)品是否符合標(biāo)準(zhǔn)所以脫色是從發(fā)酵液中提取檸1材料與方法檬酸的必要步驟。粉末活性炭生產(chǎn)需要消耗大量資源,而1.1實驗材料、試劑與儀器且是一次性的,不能重復(fù)使用。顆?；钚蕴靠梢灾貜?fù)再生粉末活性炭、顆?；钚蕴?由北京市光華木材廠提供;使用,對環(huán)境無污染,大大降低了使用成本。據(jù)南京林科001×7樹脂:山東魯抗立科藥物化學(xué)有限公司提供;檸檬所發(fā)表的資料介紹顆?；钚蕴繉π》肿恿可氐奈捷^酸發(fā)酵液:由山東某檸檬酸廠提供;752型紫外可見分光好,對大分子和有機物的吸附性能力較差。檸檬酸發(fā)酵液光度計:天津市華偉科技發(fā)展有限公司;B00-100M型中(包括色素)分子量分布較廣,所以純粹采用顆?；钚匀鋭颖?保定蘭格恒流泵有限公司。炭來對檸檬酸發(fā)酵液脫色效果不理想,達不到高標(biāo)準(zhǔn),這1.2實驗方法收稿日期:2009-02-23作者簡介高年發(fā)(1945-),男,教授主要從事發(fā)酵與酸造技術(shù)的研究工作。003,82(3):481489[15]天津商業(yè)大學(xué),一種乙醇生物傳感器核微孔酶膜的制備方法:中[10]王曉輝李新胡志鮮,等.微生物電極法測定啤酒中乙醇含量國,200810053513.3[P]2008.10.29.[冂].分析試驗室,1998,17(5):8183[16]LYS, GAO X F Determination o various alcohols based on[]管玉國戴國瑞南金.多層薄膜高性能乙醇傳感器[門,傳感bilized enzyme fluorescence capillary analysis [J].Analytica Chimica器技術(shù),1997,16(2):4547Acta,2007,588(1):140-146[12]李莎王艷艷趙紫霞等.基于納米材料聚電解質(zhì)制備高性能17]乙醇生物傳感器[].分析化學(xué),2008,36(2):227230中國煤化工午傳感器的研究[]光譜實[3]朱艷英.酒精溶液中酒精度的在線測量[J]激光雜志.2005,CNMHG的光導(dǎo)型光纖傳感器的研制[]四川大學(xué)學(xué)報.2006,38(1):76-79[4]胡長鵬洪曉斌劉桂雄等,基于軟測量技術(shù)的液相乙醇濃度在[19]吳永強,王茜.壓電生物傳感器的研究進展[J.四川理工學(xué)院線檢測系統(tǒng)]科學(xué)技術(shù)與工程2008,8(5):11831187報,2006,19(3):42